本試劑盒依托競爭法ELISA原理檢測樣本中人苯丙酸諾龍(NP)含量。NP屬于小分子類固醇物質(zhì),試劑盒酶標板預包被NP特異性抗原,孵育過程中,樣本中的NP與固相抗原競爭結(jié)合體系中的酶標抗體,洗滌去除未結(jié)合反應物后加入底物顯色,酶催化底物產(chǎn)生的有色產(chǎn)物量與結(jié)合的酶標抗體量正相關,與樣本中NP濃度負相關,通過檢測吸光度并對照標準曲線,可精準定量樣本中NP的濃度水平。
產(chǎn)品參數(shù):
產(chǎn)品名稱 | 人苯丙酸諾龍/苯丙酸去甲睪酮(NP)ELISA試劑盒 | 貨號 | Y-E666 |
英文名稱 | NP Elisa Kit | 規(guī)格 | 48T/96T |
?靈敏度:0.05ng/mL
檢測范圍:0.1ng/mL~6.4ng/mL
反應時間:競爭法孵育 75min,二抗孵育 25min,顯色 18min
顯色系統(tǒng):單組分穩(wěn)定型 TMB 顯色液
檢測波長:450nm 主波長,620nm 參比
特異性:針對 NP 特異性抗體,與睪酮、孕酮交叉反應率<3%
重復性:板內(nèi) CV≤6.5%,板間 CV≤9.5%
注意事項:屬于激素類檢測試劑盒,標本密封處理防止揮發(fā),終止液嚴禁與底物提前混合
試劑盒組成:
預包被抗體/抗原微孔板 96孔/48孔 固定捕獲抗體/抗原,結(jié)合目標物
標準品 6支/套 制備標準曲線,定量檢測依據(jù)
生物素標記抗體/抗原 1瓶 識別并結(jié)合目標物,提供酶結(jié)合位點
辣根過氧化物酶(HRP)標記親和素 1瓶 與生物素結(jié)合,催化底物顯色
底物溶液A、B 各1瓶 混合后作為酶促反應底物,產(chǎn)生顏色變化
終止液 1瓶 終止酶促反應,穩(wěn)定顯色結(jié)果
濃縮洗滌液 1瓶 清洗微孔板,去除未結(jié)合物質(zhì)
封板膜 2張 孵育過程中防止污染和揮發(fā)
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實驗操作流程:
包被微孔板中加入標準品、前處理樣本、酶標記抗原混合體系,封板 37℃孵育 70min,洗板 5 次去除游離組分。
洗滌液灌滿微孔,浸泡 35s 后棄除廢液,反復洗滌后充分拍干微孔。
每孔加入單組分 TMB 顯色液,室溫避光顯色 20min。
加入終止液終止反應,輕微震蕩酶標板混勻孔內(nèi)液體。
酶標儀 450nm 測定吸光度,記錄全部孔位原始 OD 數(shù)據(jù)。
采用四參數(shù)擬合方法繪制標準曲線,匹配濃度與吸光度對應關系。
計算樣本中 NP 含量,扣除空白孔本底值,確定最終檢測濃度。
關鍵字: 人苯丙酸諾龍/苯丙酸去甲睪酮;NP;ELISA試劑盒;
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