本試劑盒采用雙抗體夾心酶聯(lián)免疫吸附法檢測(cè)樣本中人鞭毛蛋白(flagellin)含量。試劑盒將flagellin特異性抗體預(yù)包被于酶標(biāo)板，孵育時(shí)樣本中的鞭毛蛋白抗原與固相捕獲抗體特異性結(jié)合，洗滌去除未結(jié)合雜質(zhì)后，加入生物素化檢測(cè)抗體和辣根過(guò)氧化物酶標(biāo)記鏈霉親和素，形成完整免疫夾心結(jié)構(gòu)，底物顯色后終止反應(yīng)，顯色深淺對(duì)應(yīng)樣本中flagellin濃度高低，通過(guò)酶標(biāo)儀讀數(shù)及標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)可完成定量檢測(cè)。
產(chǎn)品參數(shù)：
產(chǎn)品名稱(chēng) | 人鞭毛蛋白(flagellin)ELISA試劑盒 | 貨號(hào) | Y-E2994 |
英文名稱(chēng) | flagellin ELISA Kit | 規(guī)格 | 48T/96T |
?靈敏度：0.04ng/mL
檢測(cè)范圍：0.08ng/mL～5.1ng/mL
反應(yīng)時(shí)間：夾心法一抗捕獲 72min，二抗結(jié)合 33min，顯色 13min
顯色系統(tǒng)：HRP 介導(dǎo) TMB 顯色
檢測(cè)波長(zhǎng)：450nm
特異性：廣譜識(shí)別細(xì)菌鞭毛蛋白，與人源內(nèi)源蛋白無(wú)交叉反應(yīng)
重復(fù)性：板內(nèi) CV＜5.2%，板間 CV＜8.2%
注意事項(xiàng)：樣本需無(wú)菌處理，避免雜菌污染引入外源鞭毛蛋白干擾檢測(cè)
儲(chǔ)存與有效期：
未開(kāi)封整套試劑盒：2～8℃避光冷藏，禁止冷凍；有效期 12 個(gè)月。
開(kāi)封后保存
剩余酶標(biāo)板條：自封袋密封，內(nèi)置干燥劑 2～8℃避光；1 個(gè)月內(nèi)用完。
HRP 酶結(jié)合物、TMB 底物：避光 2～8℃，避免光照失效。
濃縮洗滌液：2～30℃常溫保存，結(jié)晶溫水溶解不影響效果。
復(fù)溶后標(biāo)準(zhǔn)品：分裝 - 20℃凍存，避免反復(fù)凍融，1 個(gè)月內(nèi)使用。
過(guò)期試劑禁止使用。
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實(shí)驗(yàn)操作流程：
微孔板各孔加入標(biāo)準(zhǔn)品、預(yù)處理待測(cè)樣本、標(biāo)記抗體混合液，封板 37℃孵育 62min，洗板 5 次。
洗滌液反復(fù)洗滌微孔，每次浸潤(rùn) 35s，棄液后吸水紙拍干。
加入 TMB 顯色工作液，避光室溫顯色 17min。
加入終止液終止顯色反應(yīng)，充分混勻孔內(nèi)液體。
酶標(biāo)儀 450nm 測(cè)定每孔 OD 數(shù)值，存檔原始數(shù)據(jù)。
采用標(biāo)準(zhǔn)品數(shù)據(jù)繪制定量標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)。
換算樣本稀釋后濃度，核算 flagellin 實(shí)際含量。
關(guān)鍵字： 人鞭毛蛋白;flagellin;ELISA試劑盒;
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