本試劑盒采用雙抗體夾心ELISA檢測(cè)原理，固相微孔板固定人肥大細(xì)胞類胰蛋白酶(MCT)特異性抗體，樣本中的MCT抗原與固相抗體特異性識(shí)別結(jié)合，后續(xù)結(jié)合酶標(biāo)檢測(cè)抗體形成穩(wěn)定免疫復(fù)合物，通過(guò)酶催化底物顯色，檢測(cè)吸光度值即可定量測(cè)定樣本中人MCT的表達(dá)水平。
基本參數(shù)?：

產(chǎn)品名稱：人肥大細(xì)胞類胰蛋白酶(MCT)ELISA試劑盒

英文名稱：MCT Elisa Kit
貨號(hào)：Y-E3065

規(guī)格：48T/96T

靈敏度：檢出限 0.05ng/mL

檢測(cè)范圍：0.12ng/mL - 14ng/mL

反應(yīng)時(shí)間：樣本孵育 82min，酶二抗 46min，顯色 17min

顯色系統(tǒng)：穩(wěn)定 TMB 顯色液

檢測(cè)波長(zhǎng)：450nm

特異性：僅識(shí)別 β 類胰蛋白酶，α 亞型交叉反應(yīng)＜2.2%

重復(fù)性：板內(nèi) CV≤5.7%，板間 CV≤7.9%

注意事項(xiàng)：采血避免劇烈震蕩誘發(fā)肥大細(xì)胞脫顆粒，造成本底異常升高
實(shí)驗(yàn)前準(zhǔn)備工作：

1. 試劑平衡與稀釋

試劑盒所有組分（酶標(biāo)板、標(biāo)準(zhǔn)品、酶結(jié)合物、底物、洗滌濃縮液、樣本稀釋液、終止液）從 2~8℃取出，室溫（20~25℃）放置平衡 30min，嚴(yán)禁直接低溫操作。

濃縮洗滌液配制：按標(biāo)簽標(biāo)注比例用去離子純水稀釋（常見(jiàn) 20× 濃縮液：1 份濃縮液 + 19 份純水），混勻備用，現(xiàn)配現(xiàn)用。

標(biāo)準(zhǔn)品復(fù)溶 / 梯度稀釋：

凍干標(biāo)準(zhǔn)品加入配套標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液充分溶解，室溫靜置 10min，輕柔吹打混勻；

按說(shuō)明書(shū)梯度倍比稀釋出 5~7 個(gè)濃度梯度標(biāo)準(zhǔn)品，單獨(dú)標(biāo)記，剩余原液分裝 - 20℃避光保存，避免反復(fù)凍融。

待測(cè)樣本預(yù)處理：血清 / 血漿、組織勻漿、細(xì)胞上清用樣本稀釋液適當(dāng)稀釋，渾濁樣本 12000r/min 離心 10min 取上清；溶血、脂血嚴(yán)重樣本棄用。

2. 耗材與設(shè)備準(zhǔn)備

設(shè)備：恒溫 37℃孵育箱、酶標(biāo)儀（450nm 主波長(zhǎng)，630nm 參比）、多通道移液槍、吸水濾紙、洗板機(jī)（或手動(dòng)洗板槽）、封板膜、離心管。

耗材無(wú)核酸酶、無(wú)熱源、無(wú)蛋白污染，移液槍提前校準(zhǔn)。

取出本次實(shí)驗(yàn)所需酶標(biāo)板條，剩余未使用板條裝入鋁箔密封袋，加干燥劑 2~8℃避光保存。

3. 孔位規(guī)劃標(biāo)記

酶標(biāo)板做好分區(qū)標(biāo)記：空白孔、零標(biāo)準(zhǔn)孔、梯度標(biāo)準(zhǔn)品孔、待測(cè)樣本孔、復(fù)孔（所有樣本、標(biāo)準(zhǔn)品建議設(shè)置雙復(fù)孔降低誤差）。
實(shí)驗(yàn)步驟如下：

試劑盒全部試劑室溫平衡 30min，稀釋洗滌工作液，配制 MCT 系列梯度標(biāo)準(zhǔn)品，劃分酶標(biāo)板檢測(cè)區(qū)域。

空白孔加稀釋液 50μL，標(biāo)準(zhǔn)與樣本孔加入對(duì)應(yīng)液體 50μL，隨即加入一步法酶結(jié)合液 100μL，封板封口。

37℃避光孵育 46min，全程避光保存反應(yīng)板。

棄液后洗滌液灌滿孔內(nèi)浸泡 42s，拍干，洗板 6 次。

加入顯色底物 A、B 液各 50μL，混勻后室溫避光顯色 15min。

滴加終止液 50μL 終止酶促反應(yīng)。

酶標(biāo)儀 450nm 讀值，換算樣本中 MCT 類胰蛋白酶濃度。
公司正在出售的產(chǎn)品：