本試劑盒依托雙抗體夾心ELISA核心原理,微孔板包被人分泌成分(SC)特異性抗體,孵育后樣本中的SC抗原與固相抗體特異性識(shí)別結(jié)合,結(jié)合酶標(biāo)檢測(cè)抗體形成穩(wěn)定免疫復(fù)合物,洗滌純化后進(jìn)行酶促底物顯色,通過(guò)檢測(cè)吸光度值,對(duì)照標(biāo)準(zhǔn)曲線定量測(cè)定樣本中人SC的含量。
基本參數(shù)?:

產(chǎn)品名稱:人分泌成分(SC)ELISA試劑盒
英文名稱:SC ELISA Kit
貨號(hào):Y-E2688
規(guī)格:48T/96T
靈敏度:最小檢出 0.09ng/mL
檢測(cè)范圍:0.3ng/mL - 32ng/mL
反應(yīng)時(shí)間:封閉 28min,樣本孵育 94min,二抗 51min,顯色 22min
顯色系統(tǒng):OPD 底物顯色,避光反應(yīng)終止
檢測(cè)波長(zhǎng):490nm
特異性:特異性結(jié)合 IgA 分泌片段,游離 IgA 交叉反應(yīng)<2.6%
重復(fù)性:批內(nèi) CV≤5.6%,批間 CV≤7.8%
注意事項(xiàng):唾液、腸液樣本需過(guò)濾除菌,微生物會(huì)分解 SC 抗原結(jié)構(gòu)
試劑盒組成:

預(yù)包被抗體/抗原微孔板 96孔/48孔 固定捕獲抗體/抗原,結(jié)合目標(biāo)物
標(biāo)準(zhǔn)品 6支/套 制備標(biāo)準(zhǔn)曲線,定量檢測(cè)依據(jù)
生物素標(biāo)記抗體/抗原 1瓶 識(shí)別并結(jié)合目標(biāo)物,提供酶結(jié)合位點(diǎn)
辣根過(guò)氧化物酶(HRP)標(biāo)記親和素 1瓶 與生物素結(jié)合,催化底物顯色
底物溶液A、B 各1瓶 混合后作為酶促反應(yīng)底物,產(chǎn)生顏色變化
終止液 1瓶 終止酶促反應(yīng),穩(wěn)定顯色結(jié)果
濃縮洗滌液 1瓶 清洗微孔板,去除未結(jié)合物質(zhì)
封板膜 2張 孵育過(guò)程中防止污染和揮發(fā)
實(shí)驗(yàn)步驟如下:

試劑室溫平衡 31min,稀釋濃縮洗滌液,逐級(jí)稀釋 SC 標(biāo)準(zhǔn)品,標(biāo)記酶標(biāo)板空白、標(biāo)準(zhǔn)、樣本及復(fù)孔。
每孔加入對(duì)應(yīng)檢測(cè)液 50μL,立刻加入一步法免疫酶工作液 100μL,封板膜封閉板口。
37℃避光孵育 47min,酶標(biāo)板平放無(wú)堆疊。
倒掉孔內(nèi)廢液,洗滌液注滿浸泡 39s,拍干,洗板 6 次。
分加顯色 A 液、B 液各 50μL,混勻后 37℃避光顯色 16min。
滴加終止液 50μL 每孔,充分混勻終止顯色。
酶標(biāo)儀 450nm 讀數(shù),擬合標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算分泌成分 SC 濃度。
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