本試劑盒采用雙抗體夾心酶聯(lián)免疫吸附檢測原理，將人巨噬細(xì)胞趨化因子特異性抗體固定于微孔板作為固相載體，待測樣本中的MCF與固相抗體特異性結(jié)合；孵育純化后加入酶標(biāo)記MCF檢測抗體，形成穩(wěn)定的免疫復(fù)合物；經(jīng)底物顯色、終止反應(yīng)后檢測各孔吸光度，吸光度數(shù)值隨樣本中巨噬細(xì)胞趨化因子含量升高而增大，對照標(biāo)準(zhǔn)曲線可精準(zhǔn)定量檢測靶標(biāo)因子含量。
基本參數(shù)?：

產(chǎn)品名稱：人巨噬細(xì)胞趨化因子(MCF)ELISA試劑盒

英文名稱：MCF   Elisa Kit
貨號：Y-E037

規(guī)格：48T/96T

靈敏度：最低檢測 5.7pg/mL

檢測范圍：11.4~730pg/mL

反應(yīng)時(shí)間：樣本孵育 62min，酶結(jié)合物 31min，顯色 10min

保存條件：試劑盒 2~8℃避光，板條獨(dú)立分裝按需取用

顯色系統(tǒng)：即用型單液顯色體系

檢測波長：450nm 單波長測定

標(biāo)準(zhǔn)曲線繪制：半對數(shù)線性擬合標(biāo)準(zhǔn)曲線，濃度對數(shù)與 OD 值構(gòu)建方程

注意事項(xiàng)：樣本避免高溫環(huán)境放置；加樣無氣泡；顯色時(shí)間嚴(yán)格按照說明書執(zhí)行
實(shí)驗(yàn)前準(zhǔn)備工作：

1. 試劑平衡與稀釋

試劑盒所有組分（酶標(biāo)板、標(biāo)準(zhǔn)品、酶結(jié)合物、底物、洗滌濃縮液、樣本稀釋液、終止液）從 2~8℃取出，室溫（20~25℃）放置平衡 30min，嚴(yán)禁直接低溫操作。

濃縮洗滌液配制：按標(biāo)簽標(biāo)注比例用去離子純水稀釋（常見 20× 濃縮液：1 份濃縮液 + 19 份純水），混勻備用，現(xiàn)配現(xiàn)用。

標(biāo)準(zhǔn)品復(fù)溶 / 梯度稀釋：

凍干標(biāo)準(zhǔn)品加入配套標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液充分溶解，室溫靜置 10min，輕柔吹打混勻；

按說明書梯度倍比稀釋出 5~7 個(gè)濃度梯度標(biāo)準(zhǔn)品，單獨(dú)標(biāo)記，剩余原液分裝 - 20℃避光保存，避免反復(fù)凍融。

待測樣本預(yù)處理：血清 / 血漿、組織勻漿、細(xì)胞上清用樣本稀釋液適當(dāng)稀釋，渾濁樣本 12000r/min 離心 10min 取上清；溶血、脂血嚴(yán)重樣本棄用。

2. 耗材與設(shè)備準(zhǔn)備

設(shè)備：恒溫 37℃孵育箱、酶標(biāo)儀（450nm 主波長，630nm 參比）、多通道移液槍、吸水濾紙、洗板機(jī)（或手動洗板槽）、封板膜、離心管。

耗材無核酸酶、無熱源、無蛋白污染，移液槍提前校準(zhǔn)。

取出本次實(shí)驗(yàn)所需酶標(biāo)板條，剩余未使用板條裝入鋁箔密封袋，加干燥劑 2~8℃避光保存。

3. 孔位規(guī)劃標(biāo)記

酶標(biāo)板做好分區(qū)標(biāo)記：空白孔、零標(biāo)準(zhǔn)孔、梯度標(biāo)準(zhǔn)品孔、待測樣本孔、復(fù)孔（所有樣本、標(biāo)準(zhǔn)品建議設(shè)置雙復(fù)孔降低誤差）。
實(shí)驗(yàn)步驟如下：

整套試劑室溫平衡 30min，取出酶標(biāo)板條，設(shè)置標(biāo)準(zhǔn)孔、樣本孔、空白對照孔，每孔上樣稀釋樣本 100μL，空白孔填充稀釋緩沖液。

直接加入酶結(jié)合物工作液 50μL，混勻后封板封口。

37℃孵育 65min，酶標(biāo)板單層平放孵育。

揭膜倒掉孔內(nèi)液體，洗板液浸泡 30s 后甩干，連續(xù)洗板 5 次，吸水紙徹底吸干殘液。

每孔依次加顯色 A、B 液各 50μL，避光顯色 16min。

加入終止液 50μL 混勻終止酶促顯色。

酶標(biāo)儀 450nm 讀取 OD 值，定量樣本 MCF 趨化因子濃度。
公司正在出售的產(chǎn)品：