本試劑盒基于雙抗體夾心ELISA檢測技術，酶標板固相包被人肝癌抗原特異性捕獲抗體，孵育時樣本中的PHC抗原與包被抗體特異性結合，再加入辣根過氧化物酶標記的檢測抗體形成特異性免疫復合物，洗板去除未結合組分后催化底物顯色，顯色深淺與樣本中肝癌抗原含量成正比，對照標準曲線可精準定量PHC濃度。
產(chǎn)品參數(shù)：

?靈敏度：最低檢出 1.8U/mL

檢測范圍：6U/mL～192U/mL

反應時間：樣本孵育 75min，二抗 50min，避光顯色 19min

顯色系統(tǒng)：預制單液顯色底物

檢測波長：450nm

特異性：主要識別肝癌特異性抗原，與 AFP 輕度同源無明顯交叉干擾

重復性：板內 CV≤8.8%，板間 CV≤11%

注意事項：黃疸重度血清樣本不宜檢測；讀數(shù)需在終止后 3 分鐘內完成
實驗前準備工作：

1. 試劑平衡與稀釋

試劑盒所有組分（酶標板、標準品、酶結合物、底物、洗滌濃縮液、樣本稀釋液、終止液）從 2~8℃取出，室溫（20~25℃）放置平衡 30min，嚴禁直接低溫操作。

濃縮洗滌液配制：按標簽標注比例用去離子純水稀釋（常見 20× 濃縮液：1 份濃縮液 + 19 份純水），混勻備用，現(xiàn)配現(xiàn)用。

標準品復溶 / 梯度稀釋：

凍干標準品加入配套標準品稀釋液充分溶解，室溫靜置 10min，輕柔吹打混勻；

按說明書梯度倍比稀釋出 5~7 個濃度梯度標準品，單獨標記，剩余原液分裝 - 20℃避光保存，避免反復凍融。

待測樣本預處理：血清 / 血漿、組織勻漿、細胞上清用樣本稀釋液適當稀釋，渾濁樣本 12000r/min 離心 10min 取上清；溶血、脂血嚴重樣本棄用。

2. 耗材與設備準備

設備：恒溫 37℃孵育箱、酶標儀（450nm 主波長，630nm 參比）、多通道移液槍、吸水濾紙、洗板機（或手動洗板槽）、封板膜、離心管。

耗材無核酸酶、無熱源、無蛋白污染，移液槍提前校準。

取出本次實驗所需酶標板條，剩余未使用板條裝入鋁箔密封袋，加干燥劑 2~8℃避光保存。

3. 孔位規(guī)劃標記

酶標板做好分區(qū)標記：空白孔、零標準孔、梯度標準品孔、待測樣本孔、復孔（所有樣本、標準品建議設置雙復孔降低誤差）。

公司正在出售的產(chǎn)品：

實驗操作流程：

整套試劑盒室溫平衡 30min，梯度稀釋標準品，酶標板劃分實驗組別，每孔上樣 50μL，空白孔空置不加液。

每孔加入一步法酶結合液 100μL，封板封口，手動橫向搖晃酶標板混勻。

37℃避光孵育 65min，孵育環(huán)境避免光照直射。

倒掉孔內反應廢液，洗滌液注滿每孔靜置 34s 倒掉，洗板 5 次，充分拍干微孔水分。

每孔加入顯色混合底物液 100μL，37℃避光顯色 18min。

加入終止液 50μL 搖勻終止顯色反應。

450nm 波長讀取 OD 值，對照標準曲線計算肝癌抗原含量。