本試劑盒基于雙抗體夾心ELISA檢測原理，酶標(biāo)板微孔固相包被人ITAC/CXCL11特異性捕獲抗體，孵育后樣本中的趨化因子抗原與包被抗體特異性結(jié)合，加入酶標(biāo)記檢測抗體形成免疫夾心復(fù)合物，洗板除雜后進(jìn)行酶促顯色，顯色深淺與樣本中ITAC/CXCL11含量成正比，通過標(biāo)準(zhǔn)曲線換算可精準(zhǔn)定量。
產(chǎn)品參數(shù)：

?靈敏度：檢出下限 0.8pg/mL

檢測范圍：2.5pg/mL～80pg/mL

反應(yīng)時(shí)間：樣本孵育 55min，酶標(biāo)記二抗 45min，顯色 13min

顯色系統(tǒng)：單液型 TMB 顯色液

檢測波長：450nm

特異性：精準(zhǔn)識別 CXCL11，與 CXCL10、CXCL9 無明顯交叉結(jié)合

重復(fù)性：板內(nèi) CV≤7.1%，板間 CV≤9.4%

注意事項(xiàng)：細(xì)胞上清樣本低溫保存運(yùn)輸；顯色反應(yīng)必須避光密閉
實(shí)驗(yàn)前準(zhǔn)備工作：

1. 試劑平衡與稀釋

試劑盒所有組分（酶標(biāo)板、標(biāo)準(zhǔn)品、酶結(jié)合物、底物、洗滌濃縮液、樣本稀釋液、終止液）從 2~8℃取出，室溫（20~25℃）放置平衡 30min，嚴(yán)禁直接低溫操作。

濃縮洗滌液配制：按標(biāo)簽標(biāo)注比例用去離子純水稀釋（常見 20× 濃縮液：1 份濃縮液 + 19 份純水），混勻備用，現(xiàn)配現(xiàn)用。

標(biāo)準(zhǔn)品復(fù)溶 / 梯度稀釋：

凍干標(biāo)準(zhǔn)品加入配套標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液充分溶解，室溫靜置 10min，輕柔吹打混勻；

按說明書梯度倍比稀釋出 5~7 個(gè)濃度梯度標(biāo)準(zhǔn)品，單獨(dú)標(biāo)記，剩余原液分裝 - 20℃避光保存，避免反復(fù)凍融。

待測樣本預(yù)處理：血清 / 血漿、組織勻漿、細(xì)胞上清用樣本稀釋液適當(dāng)稀釋，渾濁樣本 12000r/min 離心 10min 取上清；溶血、脂血嚴(yán)重樣本棄用。

2. 耗材與設(shè)備準(zhǔn)備

設(shè)備：恒溫 37℃孵育箱、酶標(biāo)儀（450nm 主波長，630nm 參比）、多通道移液槍、吸水濾紙、洗板機(jī)（或手動洗板槽）、封板膜、離心管。

耗材無核酸酶、無熱源、無蛋白污染，移液槍提前校準(zhǔn)。

取出本次實(shí)驗(yàn)所需酶標(biāo)板條，剩余未使用板條裝入鋁箔密封袋，加干燥劑 2~8℃避光保存。

3. 孔位規(guī)劃標(biāo)記

酶標(biāo)板做好分區(qū)標(biāo)記：空白孔、零標(biāo)準(zhǔn)孔、梯度標(biāo)準(zhǔn)品孔、待測樣本孔、復(fù)孔（所有樣本、標(biāo)準(zhǔn)品建議設(shè)置雙復(fù)孔降低誤差）。

公司正在出售的產(chǎn)品：

實(shí)驗(yàn)操作流程：

試劑盒室溫靜置 31min 回溫，配制標(biāo)準(zhǔn)品稀釋梯度，酶標(biāo)板分孔標(biāo)記，每孔加入待測樣本或標(biāo)準(zhǔn)品 46μL，空白孔空置。

各孔加入酶聯(lián)工作液 104μL，封板膜封口，搖床低速振蕩 1min 混勻體系。

37℃避光孵育 58min，避免強(qiáng)光照射微孔板。

去除封板膜棄凈液體，洗板液浸泡每孔 41s，連續(xù)洗板 4 次，徹底拍干微孔水分。

每孔加入顯色液 A、B 各 50μL，避光 37℃顯色 13min。

滴加終止液 50μL 輕晃混勻終止顯色。

酶標(biāo)儀 450nm 檢測吸光度，擬合標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算 CXCL11 含量。