本試劑盒采用雙抗體夾心ELISA技術(shù)檢測樣本中人谷胱甘肽S轉(zhuǎn)移酶含量。固相微孔板包被GSTs特異性捕獲抗體，待測樣本中的GSTs與固相抗體特異性識別結(jié)合，洗滌去除未結(jié)合雜質(zhì)后，加入辣根過氧化物酶標(biāo)記的GSTs檢測抗體，形成特異性夾心免疫復(fù)合物，經(jīng)洗板去除游離反應(yīng)物，加入顯色底物發(fā)生酶促反應(yīng)，顯色深淺與樣本中GSTs濃度正相關(guān)，通過吸光度檢測即可完成定量分析。
產(chǎn)品參數(shù)：
產(chǎn)品名稱 | 人谷胱甘肽S轉(zhuǎn)移酶(GSTs)ELISA試劑盒 | 貨號 | Y-E3061 |
英文名稱 | GSTs Elisa Kit | 規(guī)格 | 48T/96T |
?靈敏度：檢出下限 0.07ng/mL
檢測范圍：0.2~12.8ng/mL
反應(yīng)時間：孵育 70min，酶結(jié)合 45min，顯色 19min
顯色系統(tǒng)：雙組分 TMB 顯色液，2M 硫酸終止
檢測波長：450nm，參比 600nm
特異性：廣譜識別人 GST 總蛋白，同工酶亞型無明顯排斥
重復(fù)性：批內(nèi) CV＜6.1%，批間 CV＜8.2%
注意事項(xiàng)：組織勻漿需充分離心去除脂類雜質(zhì)，避免堵孔影響洗板
關(guān)鍵注意事項(xiàng)：
本試劑盒僅科研體外檢測，嚴(yán)禁臨床診斷使用。
全程避免試劑、板條強(qiáng)光直射，TMB 見光易失效。
移液器吸頭一次性使用，杜絕交叉污染；所有操作無酶、無熱源。
孵育溫度嚴(yán)格控制 37℃，溫度偏低會降低 OD 值、靈敏度下降。
洗板必須充分，殘液會造成非特異性結(jié)合，背景偏高。
終止后需快速讀數(shù)，放置過久吸光度會漂移，結(jié)果失真。
終止液含稀硫酸，避免接觸皮膚、眼睛，若不慎接觸大量清水沖洗。
實(shí)驗(yàn)廢棄物按生物安全廢棄物規(guī)范處理。
不同批次試劑盒組分不可混用。
試劑盒運(yùn)輸全程 2～8℃冷鏈，嚴(yán)禁高溫暴曬。
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實(shí)驗(yàn)操作流程：
試劑盒室溫放置 32min，配制 GSTs 系列梯度標(biāo)準(zhǔn)液，設(shè)置待測細(xì)胞上清孔、標(biāo)準(zhǔn)孔、空白孔。
各微孔加入 50μL 待測稀釋樣品或梯度標(biāo)準(zhǔn)品，空白孔添加稀釋緩沖液。
直接加入 HRP 標(biāo)記抗 GSTs 多克隆抗體 100μL，封板密封，37℃孵育 66min。
洗板 4 次，每輪洗滌浸泡 50s，倒扣微孔板拍凈廢液。
分別加入顯色 A 液、B 液各 50μL，避光顯色 17min。
加入終止液 50μL 終止顯色，輕晃微孔板混勻孔內(nèi)液體。
酶標(biāo)儀 450nm 讀取數(shù)值，擬合曲線定量樣本 GSTs 濃度。
關(guān)鍵字： 人谷胱甘肽S轉(zhuǎn)移酶;GSTs;ELISA試劑盒;
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