本試劑盒基于雙抗體夾心ELISA檢測(cè)原理定量檢測(cè)樣本中人谷胱甘肽硫轉(zhuǎn)移酶pi蛋白含量。固相載體預(yù)先包被GSTpi特異性抗體，待測(cè)樣本中的GSTpi蛋白與固相抗體特異性結(jié)合，洗除未結(jié)合的雜蛋白及雜質(zhì)后，加入酶標(biāo)記GSTpi配對(duì)檢測(cè)抗體，形成穩(wěn)定的免疫復(fù)合物，經(jīng)底物酶促顯色后，顯色強(qiáng)度隨樣本中GSTpi蛋白濃度升高而增強(qiáng)，通過(guò)標(biāo)準(zhǔn)曲線換算可實(shí)現(xiàn)精準(zhǔn)定量檢測(cè)。
產(chǎn)品參數(shù)：
產(chǎn)品名稱 | 人谷胱甘肽硫轉(zhuǎn)移酶pi基因(GSTpi)ELISA試劑盒 | 貨號(hào) | Y-E3060 |
英文名稱 | GSTpi Elisa Kit | 規(guī)格 | 48T/96T |
?靈敏度：檢測(cè)限 0.1ng/mL
檢測(cè)范圍：0.32~20.48ng/mL
反應(yīng)時(shí)間：捕獲孵育 82min，二抗結(jié)合 52min，顯色 13min
顯色系統(tǒng)：TMB 顯色，1mol/L H?SO?終止
檢測(cè)波長(zhǎng)：450nm/630nm
特異性：僅特異性識(shí)別 GSTpi 亞型，不識(shí)別 GSTα、GSTμ 亞型
重復(fù)性：批內(nèi) CV＜6.6%，批間 CV＜8.6%
注意事項(xiàng)：核酸蛋白共提取樣本需去除 DNA 雜質(zhì)，防止干擾抗原結(jié)合
試劑盒組成：
預(yù)包被抗體/抗原微孔板 96孔/48孔 固定捕獲抗體/抗原，結(jié)合目標(biāo)物
標(biāo)準(zhǔn)品 6支/套 制備標(biāo)準(zhǔn)曲線，定量檢測(cè)依據(jù)
生物素標(biāo)記抗體/抗原 1瓶 識(shí)別并結(jié)合目標(biāo)物，提供酶結(jié)合位點(diǎn)
辣根過(guò)氧化物酶（HRP）標(biāo)記親和素 1瓶 與生物素結(jié)合，催化底物顯色
底物溶液A、B 各1瓶 混合后作為酶促反應(yīng)底物，產(chǎn)生顏色變化
終止液 1瓶 終止酶促反應(yīng)，穩(wěn)定顯色結(jié)果
濃縮洗滌液 1瓶 清洗微孔板，去除未結(jié)合物質(zhì)
封板膜 2張 孵育過(guò)程中防止污染和揮發(fā)
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實(shí)驗(yàn)操作流程：
試劑盒全部組分室溫平衡 30min，梯度稀釋 GSTpi 重組蛋白標(biāo)準(zhǔn)品，劃分待測(cè)孔、標(biāo)準(zhǔn)孔、空白孔。
微孔內(nèi)添加 50μL 組織裂解待測(cè)上清或梯度標(biāo)準(zhǔn)品，空白孔補(bǔ)加稀釋液。
直接加入標(biāo)記酶抗 GSTpi 單克隆抗體 100μL，封板后 37℃孵育 70min 一步夾心捕獲抗原。
洗板 6 次，每次洗滌浸潤(rùn)孔底 30s，徹底拍干板條廢液。
加入顯色 A、B 液各 50μL，室溫避光顯色 20min。
加入終止液 50μL 終止顯色反應(yīng)，橫向晃動(dòng)微孔板混勻。
酶標(biāo)儀 450nm 測(cè)吸光度，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線定量樣本 GSTpi 表達(dá)量。
關(guān)鍵字： 人谷胱甘肽硫轉(zhuǎn)移酶pi基因;GSTpi;ELISA試劑盒;
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