本試劑盒依托間接ELISA技術(shù)原理，在酶標(biāo)板固相載體上包被純化的人高爾基體抗原，待測(cè)樣本中的抗高爾基體抗體可與固相抗原發(fā)生特異性免疫結(jié)合；孵育完成后洗滌去除未結(jié)合雜質(zhì)，加入酶標(biāo)記二抗與結(jié)合態(tài)的AGAA抗體結(jié)合，再次洗滌去除游離酶標(biāo)抗體，加入底物催化顯色，顯色強(qiáng)度與樣本中AGAA抗體濃度呈正相關(guān)，通過(guò)酶標(biāo)儀讀數(shù)及標(biāo)準(zhǔn)曲線完成定量檢測(cè)。
基本參數(shù)?：
產(chǎn)品名稱：人抗高爾基體抗體(AGAA)ELISA試劑盒
英文名稱：AGAA Elisa Kit
貨號(hào)：Y-E536
規(guī)格：48T/96T
靈敏度：檢出下限 0.5AU/mL
檢測(cè)范圍：0.625AU/mL～10AU/mL
反應(yīng)時(shí)間：室溫孵育 90min；酶結(jié)合物 50min；顯色 16min
保存條件：全套試劑 2～8℃避光儲(chǔ)存，濃縮洗滌液低溫防結(jié)晶
顯色系統(tǒng)：雙組分 TMB 顯色
檢測(cè)波長(zhǎng)：主 450nm，參比 620nm
標(biāo)準(zhǔn)曲線繪制：四參數(shù)擬合標(biāo)準(zhǔn)曲線，空白孔調(diào)零后換算樣本濃度
注意事項(xiàng)：微孔板孵育全程加蓋，防止液體揮發(fā)干孔；廢液按生物廢棄物處理
關(guān)鍵注意事項(xiàng)：
實(shí)驗(yàn)前需仔細(xì)閱讀對(duì)應(yīng)試劑盒的說(shuō)明書(shū)，不同試劑盒的孵育時(shí)間、加樣量可能存在差異
所有試劑需按要求儲(chǔ)存，未用完的試劑需密封后放回規(guī)定溫度（通常2-8℃或-20℃）
避免試劑污染，不同組分的移液器槍頭需分開(kāi)使用
洗板時(shí)需確保每孔都被洗滌液覆蓋，防止出現(xiàn)假陽(yáng)性結(jié)果
顯色過(guò)程需避光，避免陽(yáng)光直射影響結(jié)果
實(shí)驗(yàn)步驟如下：
樣本前處理：分離血清樣本 1:95 稀釋?zhuān)瑴u旋混勻，室溫靜置 6min，離心去除絮狀沉淀。
孔位加樣：設(shè)置對(duì)照與樣本孔，每孔加入對(duì)應(yīng)溶液 100μL，空白孔只加基礎(chǔ)稀釋液。
一步同步加酶標(biāo)試劑：所有反應(yīng)孔加入酶標(biāo)記抗人抗體工作液 100μL，封板封口。
恒溫孵育：37℃避光孵育 60min，靜置孵育不搖晃。
洗板清洗：倒掉廢液，洗滌液浸泡每孔 35s，拍干，洗板 5 輪。
顯色反應(yīng)：加入顯色底物 100μL，避光顯色 17min。
終止測(cè)讀：終止液終止，酶標(biāo)儀 450nm 讀取吸光度，對(duì)照標(biāo)準(zhǔn)判定結(jié)果。
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關(guān)鍵字： 人抗高爾基體抗體;AGAA;ELISA試劑盒;
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