本試劑盒依托間接ELISA檢測(cè)原理，微孔板固相包被純化的鼠源免疫球蛋白抗原，待測(cè)樣本中的人抗鼠抗體（HAMA）可與固相鼠抗原特異性結(jié)合，孵育反應(yīng)后洗去未結(jié)合的游離成分；加入辣根過氧化物酶標(biāo)記的抗人二抗，與固相上的HAMA抗體特異性結(jié)合，形成穩(wěn)定免疫復(fù)合物；經(jīng)洗滌后加入底物顯色液顯色，顯色深淺與樣本中HAMA含量正相關(guān)，終止顯色后檢測(cè)吸光度，通過標(biāo)準(zhǔn)曲線定量測(cè)定目標(biāo)抗體濃度。
基本參數(shù)?：
產(chǎn)品名稱：人抗鼠抗體(HAMA)ELISA試劑盒
英文名稱：HAMA ELISA Kit
貨號(hào)：Y-E2666
規(guī)格：48T/96T
靈敏度：0.2ng/mL
檢測(cè)范圍：0.4ng/mL - 12.8ng/mL
反應(yīng)時(shí)間：樣本孵育 56min，酶標(biāo)液 32min，顯色 11min
保存條件：2~8℃避光，濃縮洗滌液低溫易結(jié)晶，37℃水浴溶解后正常使用
顯色系統(tǒng)：HRP 催化 TMB 顯色
檢測(cè)波長：450nm
標(biāo)準(zhǔn)曲線繪制：線性回歸法繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，適用于免疫治療前干擾抗體篩查
注意事項(xiàng)：既往使用鼠源單抗藥物患者極易檢出陽性，會(huì)干擾后續(xù)免疫試劑盒檢測(cè)結(jié)果
關(guān)鍵注意事項(xiàng)：
實(shí)驗(yàn)前需仔細(xì)閱讀對(duì)應(yīng)試劑盒的說明書，不同試劑盒的孵育時(shí)間、加樣量可能存在差異
所有試劑需按要求儲(chǔ)存，未用完的試劑需密封后放回規(guī)定溫度（通常2-8℃或-20℃）
避免試劑污染，不同組分的移液器槍頭需分開使用
洗板時(shí)需確保每孔都被洗滌液覆蓋，防止出現(xiàn)假陽性結(jié)果
顯色過程需避光，避免陽光直射影響結(jié)果
實(shí)驗(yàn)步驟如下：
試劑盒室溫平衡 21min，取出微孔反應(yīng)板，按需拆分板條，標(biāo)注各類孔位組別與編號(hào)。
待測(cè)稀釋樣本每孔加樣 92μL，陰性對(duì)照、陽性對(duì)照孔加入對(duì)應(yīng)對(duì)照液 92μL，空白孔無液體添加。
直接向全部非空白孔加入酶標(biāo)記抗原工作液 92μL，封板膜密封，橫向晃動(dòng)酶標(biāo)板混勻。
37℃恒溫培養(yǎng)箱孵育 44min，孵育環(huán)境溫度穩(wěn)定無明顯波動(dòng)。
揭膜倒掉廢液，洗滌液加滿每孔浸泡 23s 棄除，循環(huán)洗板 4 次，吸水紙吸干微孔內(nèi)部殘留液體。
分別向每孔添加顯色 A 液、B 液各 50μL，避光混勻，室溫避光顯色 18min。
加入終止液 50μL 終止酶促反應(yīng)，混勻后 450nm 檢測(cè)吸光值，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算 HAMA 抗體濃度。
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關(guān)鍵字： 人抗鼠抗體;HAMA;ELISA試劑盒;
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