本試劑盒采用間接酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)原理，酶標(biāo)板預(yù)先包被大鼠精子特異性抗原，封閉非特異性結(jié)合位點(diǎn)后加入待測(cè)樣本，樣本中的抗精子抗體可與固相抗原特異性免疫結(jié)合，洗滌后加入酶標(biāo)記二抗孵育結(jié)合，底物顯色終止后檢測(cè)吸光度，吸光度數(shù)值隨樣本AsAb濃度升高而增加，結(jié)合標(biāo)準(zhǔn)曲線可實(shí)現(xiàn)樣本抗精子抗體的定量檢測(cè)。
基本參數(shù)?：
產(chǎn)品名稱：大鼠抗精子抗體(AsAb)ELISA試劑盒
英文名稱：AsAb ELISA Kit
貨號(hào)：Y-E1478
規(guī)格：48T/96T
靈敏度：最低檢測(cè)靈敏度≤0.1ng/mL
檢測(cè)范圍：0.2ng/mL - 14ng/mL
反應(yīng)時(shí)間：總反應(yīng)時(shí)長(zhǎng)125分鐘
保存條件：2-8℃避光密封保存，開封組分分類存放，防止交叉污染
有效期：未開封有效期8個(gè)月
顯色系統(tǒng)：穩(wěn)定型TMB單組分顯色系統(tǒng)
檢測(cè)波長(zhǎng)：450nm+630nm雙波長(zhǎng)檢測(cè)
標(biāo)準(zhǔn)曲線繪制：四參數(shù)擬合，梯度濃度覆蓋全檢測(cè)區(qū)間
特異性：特異性結(jié)合大鼠抗精子抗體，與生殖系統(tǒng)其他抗體無(wú)交叉反應(yīng)
重復(fù)性：板內(nèi)CV≤8%，板間CV≤9.5%
注意事項(xiàng)：樣本避免反復(fù)凍融，生殖樣本需無(wú)菌處理；實(shí)驗(yàn)全程無(wú)外源蛋白污染
試劑盒組成：
預(yù)包被抗體/抗原微孔板 96孔/48孔 固定捕獲抗體/抗原，結(jié)合目標(biāo)物
標(biāo)準(zhǔn)品 6支/套 制備標(biāo)準(zhǔn)曲線，定量檢測(cè)依據(jù)
生物素標(biāo)記抗體/抗原 1瓶 識(shí)別并結(jié)合目標(biāo)物，提供酶結(jié)合位點(diǎn)
辣根過氧化物酶（HRP）標(biāo)記親和素 1瓶 與生物素結(jié)合，催化底物顯色
底物溶液A、B 各1瓶 混合后作為酶促反應(yīng)底物，產(chǎn)生顏色變化
終止液 1瓶 終止酶促反應(yīng)，穩(wěn)定顯色結(jié)果
濃縮洗滌液 1瓶 清洗微孔板，去除未結(jié)合物質(zhì)
封板膜 2張 孵育過程中防止污染和揮發(fā)
實(shí)驗(yàn)步驟如下：
試劑盒室溫平衡 33min，配比稀釋洗滌緩沖液，配制酶應(yīng)用液。
區(qū)分各孔功能，空白孔無(wú)樣本，標(biāo)準(zhǔn)梯度液、質(zhì)控、待測(cè)稀釋樣本加孔，同步加入酶試劑。
封板 37℃孵育 66min。
洗板 6 次，每次浸泡 28s，拍干微孔。
顯色底物避光反應(yīng) 16min。
終止液終止反應(yīng)并混勻。
酶標(biāo)儀 450nm 測(cè)值，標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算 AsAb 抗體含量。
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關(guān)鍵字： 大鼠抗精子抗體;AsAb;ELISA試劑盒;
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