本試劑盒基于間接ELISA檢測原理，將純化的大鼠IVIgG抗原固定于酶標板孔底，待測樣本中的抗IVIgG抗體可與固相抗原發(fā)生特異性免疫結(jié)合，洗去未結(jié)合雜質(zhì)后，加入辣根過氧化物酶（HRP）標記的特異性二抗進行孵育結(jié)合，再次洗滌后加入顯色底物發(fā)生酶促顯色反應(yīng)，終止顯色后檢測吸光度，樣本吸光度數(shù)值與抗IVIgG抗體含量成正比，結(jié)合標準曲線可精準定量樣本中目標抗體水平。
基本參數(shù)?：

產(chǎn)品名稱：大鼠抗IVIgG抗體ELISA試劑盒

英文名稱：Rat anti-IVIgG antibody ELISA Kit
貨號：Y-E1337

規(guī)格：48T/96T

靈敏度：最低檢測靈敏度≤0.05ng/mL

檢測范圍：0.1ng/mL - 10ng/mL

反應(yīng)時間：樣本孵育60分鐘，二抗孵育30分鐘，顯色15分鐘，總反應(yīng)105分鐘

保存條件：所有試劑組分2-8℃避光冷藏，濃縮洗滌液可室溫短期存放，剩余試劑嚴禁凍存

有效期：原裝未拆封有效期12個月

顯色系統(tǒng)：優(yōu)化型TMB單組分顯色液，避光顯色，硫酸終止液終止

檢測波長：450nm單一波長檢測

標準曲線繪制：采用六梯度標準品濃度，四參數(shù)Logistic擬合繪制標準曲線，計算樣本濃度

特異性：特異性識別大鼠IVIgG抗體，與大鼠IgM、IgA抗體無明顯交叉反應(yīng)

重復(fù)性：板內(nèi)CV≤7%，板間CV≤9%

注意事項：洗滌步驟需充分，避免非特異性結(jié)合；標準品需現(xiàn)配現(xiàn)用，稀釋后不可留存；終止后15分鐘內(nèi)完成上機檢測
實驗前準備工作：

1. 試劑平衡與稀釋

試劑盒所有組分（酶標板、標準品、酶結(jié)合物、底物、洗滌濃縮液、樣本稀釋液、終止液）從 2~8℃取出，室溫（20~25℃）放置平衡 30min，嚴禁直接低溫操作。

濃縮洗滌液配制：按標簽標注比例用去離子純水稀釋（常見 20× 濃縮液：1 份濃縮液 + 19 份純水），混勻備用，現(xiàn)配現(xiàn)用。

標準品復(fù)溶 / 梯度稀釋：

凍干標準品加入配套標準品稀釋液充分溶解，室溫靜置 10min，輕柔吹打混勻；

按說明書梯度倍比稀釋出 5~7 個濃度梯度標準品，單獨標記，剩余原液分裝 - 20℃避光保存，避免反復(fù)凍融。

待測樣本預(yù)處理：血清 / 血漿、組織勻漿、細胞上清用樣本稀釋液適當稀釋，渾濁樣本 12000r/min 離心 10min 取上清；溶血、脂血嚴重樣本棄用。

2. 耗材與設(shè)備準備

設(shè)備：恒溫 37℃孵育箱、酶標儀（450nm 主波長，630nm 參比）、多通道移液槍、吸水濾紙、洗板機（或手動洗板槽）、封板膜、離心管。

耗材無核酸酶、無熱源、無蛋白污染，移液槍提前校準。

取出本次實驗所需酶標板條，剩余未使用板條裝入鋁箔密封袋，加干燥劑 2~8℃避光保存。

3. 孔位規(guī)劃標記

酶標板做好分區(qū)標記：空白孔、零標準孔、梯度標準品孔、待測樣本孔、復(fù)孔（所有樣本、標準品建議設(shè)置雙復(fù)孔降低誤差）。
實驗步驟如下：

試劑盒拆封后置于室溫環(huán)境回溫，按說明書比例稀釋濃縮洗滌緩沖液備用。

酶標板孔位分區(qū)標記，空白孔不加樣本，其余孔添加梯度標準品、對照品與稀釋待測樣本，同步加入酶標記物。

覆膜封板，放入 37℃溫育箱避光孵育 1 小時。

手動倒扣棄液，每孔加滿洗滌液靜置 25s 后甩掉，重復(fù)洗板 5 遍，濾紙徹底拍干微孔。

每孔等量加入顯色底物液，避光條件下 37℃反應(yīng) 12min。

快速加入終止液終止底物催化反應(yīng)，水平搖晃酶標板 10s 混勻。

使用酶標儀在 450nm 處測定吸光度，依據(jù)標準品擬合曲線換算樣本含量。
公司正在出售的產(chǎn)品：