本試劑盒基于酶聯(lián)免疫吸附間接法檢測人核仁形成區(qū)嗜銀蛋白（Ag-NORs）含量，微孔板包被Ag-NORs特異性抗原，待測樣本中的Ag-NORs抗體可與固相抗原特異性結(jié)合，洗滌后加入酶標記抗人IgG二抗，結(jié)合已吸附的樣本抗體，經(jīng)底物顯色、終止反應(yīng)后測定吸光度，吸光度值與樣本中Ag-NORs抗體含量呈正相關(guān)，結(jié)合標準曲線可定量檢測目標指標水平。
產(chǎn)品參數(shù)：

?靈敏度：檢測極限 0.08OD 值單位

檢測范圍：0.1～8.5OD U

反應(yīng)時間：抗原吸附 68min，后續(xù)顯色步驟 77min，全程 148min

顯色系統(tǒng)：銀染耦合 HRP-TMB 顯色雙系統(tǒng)

檢測波長：450nm 與 600nm 雙波長

特異性：靶向核仁 rDNA 結(jié)合蛋白，胞漿蛋白無交叉反應(yīng)

重復(fù)性：板內(nèi) CV＜7.8%，板間 CV＜10.8%

注意事項：細胞涂片樣本需固定充分，未固定樣本無法顯色
實驗前準備工作：

1. 試劑平衡與稀釋

試劑盒所有組分（酶標板、標準品、酶結(jié)合物、底物、洗滌濃縮液、樣本稀釋液、終止液）從 2~8℃取出，室溫（20~25℃）放置平衡 30min，嚴禁直接低溫操作。

濃縮洗滌液配制：按標簽標注比例用去離子純水稀釋（常見 20× 濃縮液：1 份濃縮液 + 19 份純水），混勻備用，現(xiàn)配現(xiàn)用。

標準品復(fù)溶 / 梯度稀釋：

凍干標準品加入配套標準品稀釋液充分溶解，室溫靜置 10min，輕柔吹打混勻；

按說明書梯度倍比稀釋出 5~7 個濃度梯度標準品，單獨標記，剩余原液分裝 - 20℃避光保存，避免反復(fù)凍融。

待測樣本預(yù)處理：血清 / 血漿、組織勻漿、細胞上清用樣本稀釋液適當稀釋，渾濁樣本 12000r/min 離心 10min 取上清；溶血、脂血嚴重樣本棄用。

2. 耗材與設(shè)備準備

設(shè)備：恒溫 37℃孵育箱、酶標儀（450nm 主波長，630nm 參比）、多通道移液槍、吸水濾紙、洗板機（或手動洗板槽）、封板膜、離心管。

耗材無核酸酶、無熱源、無蛋白污染，移液槍提前校準。

取出本次實驗所需酶標板條，剩余未使用板條裝入鋁箔密封袋，加干燥劑 2~8℃避光保存。

3. 孔位規(guī)劃標記

酶標板做好分區(qū)標記：空白孔、零標準孔、梯度標準品孔、待測樣本孔、復(fù)孔（所有樣本、標準品建議設(shè)置雙復(fù)孔降低誤差）。

公司正在出售的產(chǎn)品：

實驗操作流程：

試劑盒全部試劑室溫放置 33min 恢復(fù)溫度，配制工作洗滌液，取用微孔板條。

梯度稀釋 Ag-NORs 標準品，細胞提取液樣本離心取上清并稀釋。

分孔加入標準品、待測樣本、空白對照液，同步加入酶標工作液，覆膜密封板條。

37℃避光孵育 70min。

揭膜棄凈液體，洗滌液浸泡每孔 45s，拍干，重復(fù)洗板 5 次。

加入顯色底物避光顯色 19min。

終止液終止反應(yīng)，450nm 波長檢測吸光值，標準曲線定量 Ag-NORs。