本試劑盒運用經(jīng)典雙抗體夾心酶聯(lián)免疫吸附試驗原理，96孔板固相固定人嗜鉻蛋白A(CgA)特異性抗體，加入待測樣本與標準品后，樣本中的CgA抗原與固相抗體特異性結合，洗滌去除未結合游離物質(zhì)，加入酶標記檢測抗體形成夾心復合物，底物顯色后終止反應，檢測吸光度值，其與樣本中CgA含量呈正相關，可精準定量樣本中靶標蛋白濃度。
基本參數(shù)?：

產(chǎn)品名稱：人嗜鉻蛋白A(CgA)ELISA試劑盒

英文名稱：CgA   Elisa Kit
貨號：Y-E279

規(guī)格：48T/96T

靈敏度：檢出下限 0.12ng/mL

檢測范圍：0.7ng/mL ~ 180ng/mL

反應時間：室溫孵育 90min，酶標二抗 65min，底物顯色 24min，總時長 3h19min

保存條件：試劑盒 2-8℃避光，拆分板條密封加干燥劑冷藏，標準品復溶后一次性使用

顯色系統(tǒng)：雙液配比顯色體系，硫酸終止變色

檢測波長：450nm 主波長，620nm 參比波長

標準曲線繪制：四參數(shù)擬合標準曲線，7 個梯度稀釋點

注意事項：采血后盡快分離血清，CgA 易粘附于血細胞；嚴重溶血樣本直接舍棄
通用注意事項：

樣本要求

血清、血漿避免嚴重溶血、脂血、黃疸；組織勻漿充分離心去除沉淀；樣本分裝凍存，反復凍融≥3 次會導致抗原降解，檢測值偏低。

溫度控制

孵育溫度嚴格 37℃，溫箱溫度波動、室溫過低會降低結合效率，背景升高、重復性變差。

避光操作

TMB 底物、酶結合物、神經(jīng)遞質(zhì) / 維生素類靶標樣本見光易氧化，顯色全程避光，試劑避光存放。

洗板規(guī)范

洗滌不充分會造成高背景、假陽性；拍干時使用干凈吸水紙，禁止交叉污染微孔。

污染防控

實驗耗材無 DNase、RNase、蛋白酶；槍頭一次性更換，標準品與樣本避免交叉加樣；底物液變色、出現(xiàn)沉淀不可使用。

安全防護

終止液含稀硫酸，具有腐蝕性，避免接觸皮膚、黏膜；實驗廢液集中收集中和后處理，不可直接傾倒。

失效判定

試劑盒超出有效期、試劑渾濁變色、標準品梯度無明顯顏色差異，均判定失效，禁止繼續(xù)實驗。

稀釋校正

樣本 OD 值高于最高標準孔時，必須稀釋重測，最終結果乘以稀釋倍數(shù)；低于最低檢測限標注 “低于試劑盒靈敏度”。

空白對照

空白孔吸光度應極低，若空白孔 OD＞0.1，說明洗滌不充分或試劑污染，實驗作廢重做。

儲存禁忌

試劑盒不可冷凍結冰，冷凍會造成酶標抗體蛋白變性，直接導致試劑盒完全失效。
實驗步驟如下：

試劑室溫復溫 29min，配制洗滌工作液，倍比稀釋 CgA 標準品，規(guī)劃酶標板孔。

標準品孔添加 50μL 不同濃度標準品；樣本孔加 49μL 稀釋液 + 11μL 待測樣本；空白孔空置。

非空白孔加入酶偶聯(lián)抗體 100μL，封板膜密封，37℃孵育 63min。

撕膜棄液，洗滌液浸泡每孔 35s，甩干重復洗板 5 次，拍干板內(nèi)殘液。

每孔加入顯色雙液各 50μL，震蕩混勻，37℃避光顯色 16min。

滴加終止液 50μL 混勻終止反應。

酶標儀 450nm 讀數(shù)，換算樣本 CgA 濃度。
公司正在出售的產(chǎn)品：