本試劑盒基于雙抗體夾心酶聯(lián)免疫吸附原理，固相微孔板包被人親環(huán)素B(CyPB)特異性抗體，加入待測樣本與梯度標準品，樣本中的CyPB抗原與固相抗體特異性結(jié)合，孵育洗滌后加入酶標記二抗形成穩(wěn)定免疫復(fù)合物，底物發(fā)生酶促顯色反應(yīng)后終止，檢測吸光度值，數(shù)值與樣本中CyPB含量呈線性正相關(guān)，可準確測定樣本靶標濃度。
基本參數(shù)?：
產(chǎn)品名稱：人嗜環(huán)蛋白/親環(huán)素B(CyPB)ELISA試劑盒
英文名稱：CyPB ELISA Kit
貨號：Y-E2761
規(guī)格：48T/96T
靈敏度：檢出限 2.7pg/mL
檢測范圍：16pg/mL ~ 720pg/mL
反應(yīng)時間：樣本孵育 79min，酶結(jié)合物 55min，底物顯色 20min，合計 2h34min
保存條件：試劑盒主體 2～8℃避光，終止液常溫存放無避光要求，洗滌液結(jié)晶溫水溶解
顯色系統(tǒng)：A、B 顯色液依次添加混勻終止前避光
檢測波長：450nm 搭配 650nm 雙波長校正
標準曲線繪制：五參數(shù) Logistic 擬合曲線，6 組梯度標準品
注意事項：肝素抗凝血漿適配檢測，枸櫞酸鈉抗凝樣本本底偏高不建議使用
關(guān)鍵注意事項：
本試劑盒僅科研體外檢測，嚴禁臨床診斷使用。
全程避免試劑、板條強光直射，TMB 見光易失效。
移液器吸頭一次性使用，杜絕交叉污染；所有操作無酶、無熱源。
孵育溫度嚴格控制 37℃，溫度偏低會降低 OD 值、靈敏度下降。
洗板必須充分，殘液會造成非特異性結(jié)合，背景偏高。
終止后需快速讀數(shù)，放置過久吸光度會漂移，結(jié)果失真。
終止液含稀硫酸，避免接觸皮膚、眼睛，若不慎接觸大量清水沖洗。
實驗廢棄物按生物安全廢棄物規(guī)范處理。
不同批次試劑盒組分不可混用。
試劑盒運輸全程 2～8℃冷鏈，嚴禁高溫暴曬。
實驗步驟如下：
所有組分室溫平衡 32min，稀釋洗滌緩沖液，逐級稀釋 CyPB 標準品，拆分酶標板多余板條密封冷藏。
標準品孔加 50μL 梯度 CyPB 標準溶液；樣本孔加 42μL 稀釋液 + 8μL 樣本；空白孔不加試劑。
除空白孔外每孔加入 HRP 標記抗體 100μL，封板 37℃孵育 69min。
倒掉孔內(nèi)廢液，洗滌液浸泡 40s 甩干，洗板 6 次，充分拍干微孔板。
每孔添加顯色雙底物液各 50μL，輕震混勻，37℃避光顯色 17min。
加入終止液 50μL 混勻終止酶促顯色。
酶標儀 450nm 讀值，依據(jù)標準曲線定量 CyPB 濃度。
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關(guān)鍵字： 人嗜環(huán)蛋白/親環(huán)素B;CyPB;ELISA試劑盒;
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