本試劑盒采用雙抗體夾心ELISA法檢測(cè)人紅細(xì)胞膜蛋白（EMP）含量，固相微孔板包被EMP特異性單克隆抗體，加入待測(cè)樣本后，樣本中的紅細(xì)胞膜蛋白抗原與固相抗體特異性結(jié)合，洗滌后加入酶標(biāo)記檢測(cè)抗體形成免疫復(fù)合物，底物催化顯色后終止反應(yīng)，通過(guò)酶標(biāo)儀檢測(cè)吸光度，吸光度值與樣本中EMP含量成正比，結(jié)合標(biāo)準(zhǔn)曲線可完成目標(biāo)蛋白的定量檢測(cè)。
產(chǎn)品參數(shù)：
產(chǎn)品名稱 | 人紅細(xì)胞膜蛋白(EMP)ELISA試劑盒 | 貨號(hào) | Y-E2807 |
英文名稱 | EMP ELISA Kit | 規(guī)格 | 48T/96T |
?靈敏度：最低檢出 0.14μg/mL
檢測(cè)范圍：0.16μg/mL～105μg/mL
反應(yīng)時(shí)間：膜蛋白結(jié)合 63min，后續(xù)步驟 79min，總 143min
顯色系統(tǒng)：TMB A+B 顯色體系
檢測(cè)波長(zhǎng)：450nm 參考 630nm
特異性：紅細(xì)胞膜骨架蛋白特異性捕獲，胞內(nèi)蛋白不結(jié)合
重復(fù)性：批內(nèi) CV≤7.6%，批間 CV≤10.6%
注意事項(xiàng)：紅細(xì)胞裂解需輕柔，過(guò)度裂解會(huì)破壞膜蛋白結(jié)構(gòu)
試劑盒組成：
預(yù)包被抗體/抗原微孔板 96孔/48孔 固定捕獲抗體/抗原，結(jié)合目標(biāo)物
標(biāo)準(zhǔn)品 6支/套 制備標(biāo)準(zhǔn)曲線，定量檢測(cè)依據(jù)
生物素標(biāo)記抗體/抗原 1瓶 識(shí)別并結(jié)合目標(biāo)物，提供酶結(jié)合位點(diǎn)
辣根過(guò)氧化物酶（HRP）標(biāo)記親和素 1瓶 與生物素結(jié)合，催化底物顯色
底物溶液A、B 各1瓶 混合后作為酶促反應(yīng)底物，產(chǎn)生顏色變化
終止液 1瓶 終止酶促反應(yīng)，穩(wěn)定顯色結(jié)果
濃縮洗滌液 1瓶 清洗微孔板，去除未結(jié)合物質(zhì)
封板膜 2張 孵育過(guò)程中防止污染和揮發(fā)
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實(shí)驗(yàn)操作流程：
試劑盒全部試劑室溫回溫 34min，稀釋濃縮洗滌液，截取實(shí)驗(yàn)所需微孔板條。
梯度稀釋 EMP 標(biāo)準(zhǔn)品，紅細(xì)胞裂解上清樣本離心過(guò)濾后稀釋處理。
分孔加入標(biāo)準(zhǔn)品、待測(cè)樣本、空白對(duì)照液，立刻加入酶標(biāo)記二抗工作液，封板。
37℃避光孵育 61min。
揭膜棄液，洗滌液浸泡 30s，倒扣拍干，連續(xù)洗板 6 次。
加入顯色底物，37℃避光顯色 14min。
滴加終止液混勻，酶標(biāo)儀 450nm 測(cè)定 OD 值，換算 EMP 含量。
關(guān)鍵字： 人紅細(xì)胞膜蛋白;EMP;ELISA試劑盒;
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