本試劑盒基于雙夾心ELISA免疫檢測原理,固相酶標(biāo)板包被人iNV特異性抗體,可特異性結(jié)合待測樣本中的套膜蛋白,孵育結(jié)合后洗板去除未結(jié)合雜質(zhì),加入酶標(biāo)記二抗形成完整免疫復(fù)合物,經(jīng)二次洗滌去除游離標(biāo)記物,加入顯色底物發(fā)生酶促顯色反應(yīng),顯色深淺與樣本中iNV含量呈正相關(guān),通過吸光度檢測與標(biāo)準(zhǔn)曲線比對,實現(xiàn)樣本套膜蛋白的定量檢測。
基本參數(shù)?:

產(chǎn)品名稱:人套膜蛋白(iNV)ELISA試劑盒
英文名稱:iNV ELISA Kit
貨號:Y-E3501
規(guī)格:48T/96T
靈敏度:檢出下限 0.055ng/mL
檢測范圍:0.1~7.8ng/mL
反應(yīng)時間:室溫振蕩孵育樣本 70min,二抗 48min,顯色 17min
保存條件:未拆封試劑盒 2~8℃;已稀釋工作液不可冷藏重復(fù)使用
顯色系統(tǒng):即用型單一 TMB 顯色液
檢測波長:450nm 讀數(shù),600nm 參比
標(biāo)準(zhǔn)曲線繪制:手動擬合曲線,R2 大于 0.99 方可判定有效
注意事項:整板操作需同步加樣,前后加樣時差不宜超過 10min
關(guān)鍵注意事項:

實驗前需仔細(xì)閱讀對應(yīng)試劑盒的說明書,不同試劑盒的孵育時間、加樣量可能存在差異
所有試劑需按要求儲存,未用完的試劑需密封后放回規(guī)定溫度(通常2-8℃或-20℃)
避免試劑污染,不同組分的移液器槍頭需分開使用
洗板時需確保每孔都被洗滌液覆蓋,防止出現(xiàn)假陽性結(jié)果
顯色過程需避光,避免陽光直射影響結(jié)果
實驗步驟如下:

試劑盒室溫靜置 25min,取出 iNV 抗體包被微孔板,棄去孔中液體,洗板 2 遍后倒扣拍干。
劃分孔位:空白對照、梯度標(biāo)準(zhǔn)品、待測樣本;標(biāo)準(zhǔn)品孔加入 iNV 標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液 55μL,樣本孔加入組織裂解稀釋樣本 55μL,空白孔補(bǔ)稀釋液。
每孔加入 HRP 標(biāo)記檢測抗體 55μL,封板密封,37℃孵育 62min。
去除封板膜,倒掉孔內(nèi)反應(yīng)液,洗滌液浸泡每孔 35s 棄液,洗板 4 次,拍干微孔。
每孔加入顯色底物混合液 100μL,遮光 37℃顯色 19min。
滴加終止液 50μL,輕微晃動酶標(biāo)板終止顯色。
450nm 波長檢測吸光度,標(biāo)準(zhǔn)曲線換算樣本套膜蛋白含量。
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關(guān)鍵字: 人套膜蛋白;iNV;ELISA試劑盒;
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