本試劑盒采用雙抗體夾心ELISA檢測原理，固相微孔板固定LUM特異性捕獲抗體，待測樣本中的基膜聚糖可與固相抗體特異性結(jié)合，隨后加入酶標(biāo)記LUM檢測抗體形成穩(wěn)定夾心復(fù)合物，洗滌去除未結(jié)合的游離蛋白與抗體后，添加底物液觸發(fā)酶促顯色反應(yīng)，顯色深淺對應(yīng)樣本中LUM的濃度高低，通過酶標(biāo)儀讀數(shù)及標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算，可精準(zhǔn)定量樣本中LUM的表達(dá)水平。
產(chǎn)品參數(shù)：
產(chǎn)品名稱 | 人基膜聚糖/內(nèi)腔蛋白(LUM)ELISA試劑盒 | 貨號 | Y-E2629 |
英文名稱 | LUM ELISA Kit | 規(guī)格 | 48T/96T |
?靈敏度：≤0.2ng/mL
檢測范圍：0.4ng/mL~12.8ng/mL
反應(yīng)時(shí)間：樣本室溫孵育 80min；二抗 40min；顯色 19min
保存條件：試劑盒 2~8℃；顯色液必須避光單獨(dú)存放，見光易失效
顯色系統(tǒng)：HRP-TMB 單液顯色
檢測波長：450nm
標(biāo)準(zhǔn)曲線繪制：6 點(diǎn)標(biāo)準(zhǔn)梯度，酶標(biāo)儀內(nèi)置程序自動生成標(biāo)準(zhǔn)曲線與樣本濃度
注意事項(xiàng)：所有試劑使用前混勻，沉淀試劑禁止使用
儲存與有效期：
未開封整套試劑盒：2～8℃避光冷藏，禁止冷凍；有效期 12 個(gè)月。
開封后保存
剩余酶標(biāo)板條：自封袋密封，內(nèi)置干燥劑 2～8℃避光；1 個(gè)月內(nèi)用完。
HRP 酶結(jié)合物、TMB 底物：避光 2～8℃，避免光照失效。
濃縮洗滌液：2～30℃常溫保存，結(jié)晶溫水溶解不影響效果。
復(fù)溶后標(biāo)準(zhǔn)品：分裝 - 20℃凍存，避免反復(fù)凍融，1 個(gè)月內(nèi)使用。
過期試劑禁止使用。
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實(shí)驗(yàn)操作流程：
樣本制備：細(xì)胞培養(yǎng)上清、組織勻漿上清經(jīng)稀釋處理，渦旋振蕩混勻，避免反復(fù)凍融。
微孔板加樣：LUM 包被 96 孔板，標(biāo)準(zhǔn)品與待測樣本每孔加入 100μL，空白孔添加稀釋緩沖液。
同步添加酶標(biāo)結(jié)合物：無前置洗板，直接加入酶標(biāo)記檢測抗體 50μL，水平搖勻。
封板孵育：37℃避光孵育 65min。
多輪洗板：洗滌液洗板 4 次，浸泡 25s 后拍干廢液。
避光顯色：加入 TMB 顯色底物，37℃顯色 15min。
終止檢測：終止液終止反應(yīng)，450nm 讀取吸光度，計(jì)算樣本 LUM 表達(dá)量。
關(guān)鍵字： 人基膜聚糖/內(nèi)腔蛋白;LUM;ELISA試劑盒;
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