本試劑盒基于雙抗體夾心ELISA檢測原理,固相微孔板固定MMP-9特異性捕獲抗體,待測樣本中的基質(zhì)金屬蛋白酶9可與固相抗體特異性結(jié)合,孵育后加入酶標(biāo)記MMP-9檢測抗體形成穩(wěn)定夾心復(fù)合物,經(jīng)洗滌去除游離組分后,底物在酶的催化下產(chǎn)生顯色反應(yīng),顯色深淺與樣本中MMP-9濃度呈正相關(guān),通過吸光度檢測與標(biāo)準(zhǔn)曲線擬合,可實現(xiàn)精準(zhǔn)定量檢測。
產(chǎn)品參數(shù):
產(chǎn)品名稱 | 人基質(zhì)金屬蛋白酶9/明膠酶B(MMP-9/GelatinaseB)ELISA試劑盒 | 貨號 | Y-E3104 |
英文名稱 | MMP-9 Elisa Kit | 規(guī)格 | 48T/96T |
?靈敏度:≤0.04ng/mL
檢測范圍:0.125ng/mL~4ng/mL
反應(yīng)時間:室溫樣本孵育 78min;二抗 42min;顯色 18min
保存條件:試劑盒 2~8℃,終止液可常溫避光存放
顯色系統(tǒng):A 液 + B 液混合后顯色
檢測波長:450nm
標(biāo)準(zhǔn)曲線繪制:標(biāo)準(zhǔn)品梯度稀釋做復(fù)孔,取均值繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線換算樣本濃度
注意事項:洗板次數(shù)不少于 5 次,防止游離酶標(biāo)記物殘留造成背景偏高
儲存與有效期:
未開封整套試劑盒:2~8℃避光冷藏,禁止冷凍;有效期 12 個月。
開封后保存
剩余酶標(biāo)板條:自封袋密封,內(nèi)置干燥劑 2~8℃避光;1 個月內(nèi)用完。
HRP 酶結(jié)合物、TMB 底物:避光 2~8℃,避免光照失效。
濃縮洗滌液:2~30℃常溫保存,結(jié)晶溫水溶解不影響效果。
復(fù)溶后標(biāo)準(zhǔn)品:分裝 - 20℃凍存,避免反復(fù)凍融,1 個月內(nèi)使用。
過期試劑禁止使用。
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實驗操作流程:
樣本預(yù)處理:血清、組織勻漿上清稀釋處理,溶血、嚴(yán)重脂血樣本舍棄不用。
微孔板加液:MMP-9 預(yù)包被板,梯度標(biāo)準(zhǔn)品、待測樣本、空白孔每孔加入液體 100μL。
同步加入酶結(jié)合物:直接加注酶標(biāo)記檢測抗體 55μL,輕微震蕩酶標(biāo)板混勻。
密封恒溫孵育:37℃避光孵育 66min。
洗滌流程:洗板 4 次,浸泡 32s 后徹底拍干廢液。
避光顯色:TMB 底物顯色 16min,嚴(yán)格把控時間。
終止檢測:加入終止液,450nm 測吸光度,繪制曲線定量 MMP-9。
關(guān)鍵字: 人基質(zhì)金屬蛋白酶9/明膠酶B;MMP-9/GelatinaseB;ELISA試劑盒;
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