本試劑盒采用高特異性雙抗體夾心ELISA技術(shù)，固相酶標(biāo)板包被純化的大鼠MMP-9抗體，能夠特異性捕獲待測(cè)樣本中的MMP-9抗原分子。孵育結(jié)合并洗板后，加入HRP標(biāo)記的抗大鼠MMP-9抗體，形成固相抗體-抗原-酶標(biāo)抗體免疫復(fù)合物。后續(xù)通過TMB底物顯色、終止液終止反應(yīng)，檢測(cè)450nm吸光度值，結(jié)合標(biāo)準(zhǔn)曲線即可精準(zhǔn)定量大鼠血清、組織勻漿等樣本中MMP-9的濃度。
產(chǎn)品參數(shù)：
產(chǎn)品名稱 | 大鼠基質(zhì)金屬蛋白酶9/明膠酶B(MMP-9/Gelatinase B) ELISA試劑盒 | 貨號(hào) | Y-E1438 |
英文名稱 | MMP-9 ELISA Kit | 規(guī)格 | 48T/96T |
?靈敏度：最低檢測(cè)濃度≤0.04ng/mL
檢測(cè)范圍：0.08ng/mL - 15ng/mL
反應(yīng)時(shí)間：總反應(yīng)時(shí)長(zhǎng)110min（孵育80min、避光顯色30min）
保存條件：2-8℃冷藏保存，所有試劑禁止冷凍，避免蛋白變性失效
有效期：未開封12個(gè)月
顯色系統(tǒng)：高靈敏TMB顯色系統(tǒng)，低背景、高顯色度
檢測(cè)波長(zhǎng)：450nm，630nm參比校正
標(biāo)準(zhǔn)曲線繪制：梯度標(biāo)準(zhǔn)品測(cè)定OD值，四參數(shù)擬合曲線，R2≥0.992
特異性：特異性識(shí)別大鼠MMP-9，與MMP-2及其他基質(zhì)蛋白酶無(wú)交叉反應(yīng)
重復(fù)性：板內(nèi)CV≤6%，板間CV≤8%
注意事項(xiàng)：實(shí)驗(yàn)全程無(wú)熱源、無(wú)酶污染；樣本濃度超出檢測(cè)范圍需梯度稀釋后重新檢測(cè)
關(guān)鍵注意事項(xiàng)：
實(shí)驗(yàn)前需仔細(xì)閱讀對(duì)應(yīng)試劑盒的說明書，不同試劑盒的孵育時(shí)間、加樣量可能存在差異
所有試劑需按要求儲(chǔ)存，未用完的試劑需密封后放回規(guī)定溫度（通常2-8℃或-20℃）
避免試劑污染，不同組分的移液器槍頭需分開使用
洗板時(shí)需確保每孔都被洗滌液覆蓋，防止出現(xiàn)假陽(yáng)性結(jié)果
顯色過程需避光，避免陽(yáng)光直射影響結(jié)果
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實(shí)驗(yàn)操作流程：
試劑盒室溫靜置 30min，稀釋濃縮洗滌液，配制梯度 MMP-9 標(biāo)準(zhǔn)品，拆分酶標(biāo)板條。
標(biāo)準(zhǔn)孔加梯度標(biāo)準(zhǔn)品 50μL，待測(cè)孔加入稀釋后生物樣本 50μL，空白孔添加等量稀釋液。
全部孔位加入酶標(biāo)記抗體 100μL，封板密封，37℃孵育 62min。
洗板 5 次，每次洗液浸泡 30s，棄液拍干微孔。
避光加顯色 A、B 液各 50μL，37℃避光顯色 17min。
加入終止液 50μL 混勻終止反應(yīng)。
450nm 波長(zhǎng)檢測(cè)吸光度，計(jì)算樣本 MMP-9/Gelatinase B 濃度。
關(guān)鍵字： 大鼠基質(zhì)金屬蛋白酶9/明膠酶B;MMP-9/Gelatinase B;ELISA試劑盒;
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