本試劑盒采用雙抗體夾心ELISA檢測法,將抗大鼠MMP-7特異性抗體包被于酶標(biāo)板作為固相抗體,用于捕獲樣本中的MMP-7抗原。加入標(biāo)準(zhǔn)品和待測大鼠樣本孵育結(jié)合后,洗滌除去未結(jié)合物質(zhì),再加入HRP標(biāo)記的MMP-7二抗,形成特異性免疫復(fù)合物。經(jīng)底物顯色、終止反應(yīng)后,檢測各孔450nm波長吸光度,依據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線的線性關(guān)系,精準(zhǔn)測定大鼠樣本中MMP-7蛋白的濃度。
產(chǎn)品參數(shù):
產(chǎn)品名稱 | 大鼠基質(zhì)金屬蛋白酶7(MMP-7)ELISA試劑盒 | 貨號 | Y-E1511 |
英文名稱 | MMP-7 ELISA Kit | 規(guī)格 | 48T/96T |
?靈敏度:最低檢測濃度≤0.06ng/mL
檢測范圍:0.12ng/mL - 12ng/mL
反應(yīng)時間:總反應(yīng)時長115min(孵育85min、顯色30min)
保存條件:2-8℃冷藏,開封后底物液避光保存,2周內(nèi)用完
有效期:未開封12個月
顯色系統(tǒng):高靈敏TMB顯色體系,背景值低
檢測波長:450nm,630nm校正
標(biāo)準(zhǔn)曲線繪制:標(biāo)準(zhǔn)品梯度稀釋,檢測吸光度,四參數(shù)擬合,線性擬合度≥0.99
特異性:特異性識別大鼠MMP-7,與其他基質(zhì)金屬蛋白酶無交叉反應(yīng)
重復(fù)性:板內(nèi)CV≤7%,板間CV≤8%
注意事項:洗滌步驟需徹底,去除未結(jié)合雜質(zhì);顯色時間嚴(yán)格把控,避免過深或過淺影響結(jié)果
儲存與有效期:
未開封整套試劑盒:2~8℃避光冷藏,禁止冷凍;有效期 12 個月。
開封后保存
剩余酶標(biāo)板條:自封袋密封,內(nèi)置干燥劑 2~8℃避光;1 個月內(nèi)用完。
HRP 酶結(jié)合物、TMB 底物:避光 2~8℃,避免光照失效。
濃縮洗滌液:2~30℃常溫保存,結(jié)晶溫水溶解不影響效果。
復(fù)溶后標(biāo)準(zhǔn)品:分裝 - 20℃凍存,避免反復(fù)凍融,1 個月內(nèi)使用。
過期試劑禁止使用。
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實驗操作流程:
試劑盒室溫放置 26min,配制洗滌液,稀釋 MMP-7 標(biāo)準(zhǔn)品,裁剪所需酶標(biāo)板條。
設(shè)置三組孔位,標(biāo)準(zhǔn)孔加梯度標(biāo)品 50μL,樣本孔加待測樣本 50μL,空白孔加稀釋緩沖液。
每孔加入酶抗體溶液 100μL,封口覆膜,37℃恒溫孵育 58min。
棄去液體,洗板 4 次,每次洗液浸泡 28s,拍干微孔殘留液體。
避光添加顯色 A、B 液各 50μL,37℃避光顯色 13min。
滴入終止液 50μL,混勻終止顯色。
450nm 讀取吸光值,換算標(biāo)準(zhǔn)曲線得到 MMP-7 檢測結(jié)果。
關(guān)鍵字: 大鼠基質(zhì)金屬蛋白酶7;MMP-7;ELISA試劑盒;
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