本試劑盒運用雙抗體夾心ELISA原理，固相載體包被HSL特異性捕獲抗體，待測樣本中的激素敏感性脂肪酶與固相抗體特異性結(jié)合，孵育后加入酶標(biāo)記HSL檢測抗體形成穩(wěn)定夾心復(fù)合物，洗滌去除多余游離蛋白與抗體后，加入底物催化顯色，有色產(chǎn)物的吸光度值與樣本中HSL含量正相關(guān)，對照標(biāo)準(zhǔn)曲線即可精準(zhǔn)定量樣本中HSL的表達水平。
產(chǎn)品參數(shù)：
產(chǎn)品名稱 | 人激素敏感性脂肪酶(HSL)ELISA試劑盒 | 貨號 | Y-E3041 |
英文名稱 | HSL Elisa Kit | 規(guī)格 | 48T/96T |
?靈敏度：≤0.1ng/mL
檢測范圍：0.2ng/mL~6.4ng/mL
反應(yīng)時間：樣本孵育 84min；二抗 41min；顯色 19min
保存條件：整套試劑 2~8℃密封保存，開封后 1 個月內(nèi)使用完畢
顯色系統(tǒng)：雙組份 TMB 顯色底物
檢測波長：450nm
標(biāo)準(zhǔn)曲線繪制：扣除空白 OD 值，四參數(shù)擬合生成標(biāo)準(zhǔn)曲線方程計算濃度
注意事項：組織樣本提取時全程低溫操作，抑制脂肪酶蛋白降解
儲存與有效期：
未開封整套試劑盒：2～8℃避光冷藏，禁止冷凍；有效期 12 個月。
開封后保存
剩余酶標(biāo)板條：自封袋密封，內(nèi)置干燥劑 2～8℃避光；1 個月內(nèi)用完。
HRP 酶結(jié)合物、TMB 底物：避光 2～8℃，避免光照失效。
濃縮洗滌液：2～30℃常溫保存，結(jié)晶溫水溶解不影響效果。
復(fù)溶后標(biāo)準(zhǔn)品：分裝 - 20℃凍存，避免反復(fù)凍融，1 個月內(nèi)使用。
過期試劑禁止使用。
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實驗操作流程：
樣本制備：脂肪組織裂解上清、血清樣本稀釋混勻，避免蛋白長時間室溫放置降解。
微孔板加液：HSL 包被微孔板，梯度標(biāo)準(zhǔn)品、待測樣本、空白孔單孔加樣 100μL。
共加酶偶聯(lián)抗體：不前置洗板，直接加入酶標(biāo)記工作液 55μL，輕晃混勻封板。
孵育結(jié)合反應(yīng)：37℃避光孵育 67min。
洗滌除游離反應(yīng)物：洗板 5 次，每次浸泡 32s，吸水紙拍干微孔。
底物顯色：加入顯色 A、B 液各 50μL，避光顯色 18min。
終止上機定量：終止液終止反應(yīng)，450nm 波長讀取 OD 值，計算 HSL 含量。
關(guān)鍵字： 人激素敏感性脂肪酶;HSL;ELISA試劑盒;
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