本試劑盒基于間接酶聯(lián)免疫吸附檢測(cè)原理,微孔板預(yù)包被純化的人腮腺管特異性抗原,待測(cè)樣本中的抗腮腺管抗體可與固相抗原特異性結(jié)合,形成穩(wěn)定的抗原-抗體復(fù)合物;經(jīng)洗滌去除未結(jié)合成分后,加入酶標(biāo)記抗人二抗與目標(biāo)抗體結(jié)合,再次洗板去除游離酶標(biāo)抗體;加入顯色底物進(jìn)行酶促反應(yīng),顯色強(qiáng)度與樣本中anti-parotid duct Ab含量呈正相關(guān),終止反應(yīng)后檢測(cè)吸光度,通過(guò)標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)實(shí)現(xiàn)精準(zhǔn)定量檢測(cè)。
基本參數(shù)?:

產(chǎn)品名稱(chēng):人抗腮腺管抗體(anti-parotid duct Ab)ELISA試劑盒
英文名稱(chēng):anti-parotid duct antibody Elisa Kit
貨號(hào):Y-E422
規(guī)格:48T/96T
靈敏度:0.48AU/mL
檢測(cè)范圍:0.96AU/mL - 30.72AU/mL
反應(yīng)時(shí)間:孵育兩步分別 58min、42min,避光顯色 12min
保存條件:2~8℃避光,終止液遠(yuǎn)離堿性試劑存放
顯色系統(tǒng):HRP 介導(dǎo) TMB 顯色
檢測(cè)波長(zhǎng):450nm
標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)繪制:6 個(gè)濃度梯度,剔除異常值后做非線(xiàn)性回歸曲線(xiàn)
注意事項(xiàng):干燥綜合征輔助檢測(cè),唾液腺急性炎癥可出現(xiàn)一過(guò)性陽(yáng)性
試劑盒組成:

預(yù)包被抗體/抗原微孔板 96孔/48孔 固定捕獲抗體/抗原,結(jié)合目標(biāo)物
標(biāo)準(zhǔn)品 6支/套 制備標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn),定量檢測(cè)依據(jù)
生物素標(biāo)記抗體/抗原 1瓶 識(shí)別并結(jié)合目標(biāo)物,提供酶結(jié)合位點(diǎn)
辣根過(guò)氧化物酶(HRP)標(biāo)記親和素 1瓶 與生物素結(jié)合,催化底物顯色
底物溶液A、B 各1瓶 混合后作為酶促反應(yīng)底物,產(chǎn)生顏色變化
終止液 1瓶 終止酶促反應(yīng),穩(wěn)定顯色結(jié)果
濃縮洗滌液 1瓶 清洗微孔板,去除未結(jié)合物質(zhì)
封板膜 2張 孵育過(guò)程中防止污染和揮發(fā)
實(shí)驗(yàn)步驟如下:

試劑盒室溫靜置 33min,取出包被微孔板,標(biāo)記空白孔、對(duì)照孔、待測(cè)樣本孔,拆分多余板條密封冷藏。
稀釋后待測(cè)樣本加入樣本孔 58μL,陰性、陽(yáng)性對(duì)照孔加入對(duì)應(yīng)對(duì)照品 58μL,空白孔不加任何試劑。
直接向所有檢測(cè)孔添加酶標(biāo)記抗原液 58μL,封板嚴(yán)實(shí)封口,低速震蕩酶標(biāo)板混勻反應(yīng)液。
37℃恒溫孵育 66min,全程環(huán)境溫度恒定,禁止隨意挪動(dòng)板體。
揭膜倒掉廢液,洗滌液灌滿(mǎn)每孔浸泡 38s 后棄除,循環(huán)洗板 5 次,吸水紙用力拍干微孔。
每孔依次滴加顯色 A、B 液各 50μL,避光條件下 37℃顯色 10min。
加入終止液 50μL 終止酶促反應(yīng),混勻后酶標(biāo)儀 450nm 讀取吸光值,對(duì)照標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)計(jì)算抗體含量。
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