本試劑盒采用雙抗體夾心ELISA檢測原理，利用純化的人甲酰甲硫氨酸特異性單克隆抗體包被微孔板，制備固相抗體，向微孔中加入待測樣本，樣本中的fMet抗原可與固相抗體特異性結(jié)合；孵育洗滌后，加入辣根過氧化物酶標記的fMet檢測抗體，形成“固相抗體-抗原-酶標抗體”的免疫復合物，徹底洗滌未結(jié)合酶標抗體后，加入底物液顯色，在酶的催化下產(chǎn)生有色產(chǎn)物，產(chǎn)物吸光度值與樣本中人甲酰甲硫氨酸含量呈正相關(guān)，依據(jù)標準曲線即可定量檢測樣本中靶標含量。
產(chǎn)品參數(shù)：

?靈敏度：最低檢出濃度 2.3pg/mL

檢測范圍：5~320pg/mL

反應時間：樣本結(jié)合孵育 70min，酶標記物孵育 40min，顯色 12min

保存條件：整套試劑 2~8℃冷藏，洗滌濃縮液可室溫長期存放

顯色系統(tǒng)：可溶性單組分 TMB 顯色液

檢測波長：450nm 單一波長測定

標準曲線繪制：四參數(shù)擬合，設(shè)置空白孔歸零后依據(jù)梯度標品 OD 值建立曲線

注意事項：尿液樣本需離心去除雜質(zhì)；不可交叉使用槍頭避免交叉污染；顯色超時務必及時終止
關(guān)鍵注意事項：

實驗前需仔細閱讀對應試劑盒的說明書，不同試劑盒的孵育時間、加樣量可能存在差異

所有試劑需按要求儲存，未用完的試劑需密封后放回規(guī)定溫度（通常2-8℃或-20℃）

避免試劑污染，不同組分的移液器槍頭需分開使用

洗板時需確保每孔都被洗滌液覆蓋，防止出現(xiàn)假陽性結(jié)果

顯色過程需避光，避免陽光直射影響結(jié)果

公司正在出售的產(chǎn)品：

實驗操作流程：

試劑盒常溫平衡 32min，選取酶標板條，排布標準品孔、待測樣本孔、空白孔，每孔加入稀釋處理后樣品 100μL，空白孔補稀釋液。

直接向各孔添加酶標記二抗工作液 55μL，手動緩慢搖勻酶標板，封板膜封口防止液體揮發(fā)。

37℃恒溫培養(yǎng)箱孵育 70min，酶標板單層平放，不可多層疊加堆放。

撕掉封板膜，棄凈孔內(nèi)液體，每孔加滿洗板液靜置 30s 后拍干，重復洗板 6 次，吸水紙按壓吸干剩余液體。

每孔加入顯色底物 A 50μL、底物 B 50μL，避光 37℃顯色 16min。

每孔加入終止液 50μL，充分混勻孔內(nèi)液體，終止顯色反應。

酶標儀 450nm 波長檢測 OD 值，對照標準曲線計算樣本 fMet 具體濃度。