本試劑盒運用雙抗體夾心酶聯(lián)免疫吸附檢測原理，微孔板固相固定人降解加速因子特異性捕獲抗體，待測樣本中的DAF抗原與固相抗體特異性結(jié)合；經(jīng)孵育、洗滌去除非特異性結(jié)合物后，加入辣根過氧化物酶標(biāo)記的DAF檢測抗體，形成穩(wěn)定的免疫復(fù)合物；隨后進行底物顯色、終止反應(yīng)，檢測各孔吸光度，吸光度數(shù)值隨樣本中DAF含量升高而增大，依據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線即可定量測定樣本中人降解加速因子的濃度。
產(chǎn)品參數(shù)：
產(chǎn)品名稱 | 人降解加速因子(DAF)ELISA試劑盒 | 貨號 | Y-E2961 |
英文名稱 | DAF ELISA Kit | 規(guī)格 | 48T/96T |
?靈敏度：最低可測 4.5pg/mL
檢測范圍：9~576pg/mL
反應(yīng)時間：加樣孵育 95min，酶標(biāo)記抗體 55min，避光顯色 13min
保存條件：試劑盒 2~8℃密封保存，開封后各組分 1 個月內(nèi)使用完畢
顯色系統(tǒng)：A、B 雙試劑混合后顯色
檢測波長：450nm，620nm 做空白參比
標(biāo)準(zhǔn)曲線繪制：二次多項式擬合標(biāo)曲，梯度稀釋標(biāo)準(zhǔn)品測定后生成計算公式
注意事項：樣本避免高溫放置；洗板步驟每孔洗滌不少于 5 次；底物液出現(xiàn)藍(lán)色即失效禁止使用
儲存與有效期：
未開封整套試劑盒：2～8℃避光冷藏，禁止冷凍；有效期 12 個月。
開封后保存
剩余酶標(biāo)板條：自封袋密封，內(nèi)置干燥劑 2～8℃避光；1 個月內(nèi)用完。
HRP 酶結(jié)合物、TMB 底物：避光 2～8℃，避免光照失效。
濃縮洗滌液：2～30℃常溫保存，結(jié)晶溫水溶解不影響效果。
復(fù)溶后標(biāo)準(zhǔn)品：分裝 - 20℃凍存，避免反復(fù)凍融，1 個月內(nèi)使用。
過期試劑禁止使用。
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實驗操作流程：
整套試劑室溫放置 33min，取用酶標(biāo)板，劃分標(biāo)準(zhǔn)孔、樣本孔、空白孔，每孔上樣稀釋樣本 100μL，空白孔加稀釋緩沖液。
直接向各孔加入酶偶聯(lián)抗體液 55μL，搖勻后封板膜密封。
37℃恒溫孵育 70min，全程避光操作。
撕膜棄液，洗板液浸潤每孔 30s 后拍干，重復(fù)洗板 5 次。
每孔加顯色底物 A、B 各 50μL，避光 37℃顯色 18min。
加入終止液 50μL 混勻，強制終止反應(yīng)。
450nm 波長測定 OD 值，空白調(diào)零，換算樣本 DAF 濃度。
關(guān)鍵字： 人降解加速因子;DAF;ELISA試劑盒;
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