本試劑盒采用雙抗體夾心酶聯(lián)免疫吸附檢測原理，固相酶標板微孔固定人中期因子特異性抗體，加入標準品和待測生物樣本后，樣本中的MK抗原與固相抗體特異性免疫結合，洗板去除未結合物質，加入HRP標記的MK檢測抗體形成夾心復合物，底物顯色深淺與MK含量呈正相關，終止反應后檢測OD值，結合標準曲線完成樣本中中期因子的定量檢測。
基本參數(shù)?：
產(chǎn)品名稱：人中期因子(MK)ELISA試劑盒
英文名稱：MK Elisa Kit
貨號：Y-E298
規(guī)格：48T/96T
靈敏度：檢測限 0.13ng/mL
檢測范圍：0.26ng/mL - 16.64ng/mL
反應時間：一抗溫育 36min，二抗 36min，避光顯色 14min
保存條件：2-8℃冷藏，標準品分裝凍存可延長使用周期
顯色系統(tǒng)：穩(wěn)定型單組份 TMB 底物
檢測波長：450nm 單波長讀數(shù)
標準曲線繪制：剔除極值孔后以線性法繪制標準曲線
注意事項：腫瘤組織樣本避免反復凍融超過 2 次，蛋白降解會導致結果偏低
關鍵注意事項：
本試劑盒僅科研體外檢測，嚴禁臨床診斷使用。
全程避免試劑、板條強光直射，TMB 見光易失效。
移液器吸頭一次性使用，杜絕交叉污染；所有操作無酶、無熱源。
孵育溫度嚴格控制 37℃，溫度偏低會降低 OD 值、靈敏度下降。
洗板必須充分，殘液會造成非特異性結合，背景偏高。
終止后需快速讀數(shù)，放置過久吸光度會漂移，結果失真。
終止液含稀硫酸，避免接觸皮膚、眼睛，若不慎接觸大量清水沖洗。
實驗廢棄物按生物安全廢棄物規(guī)范處理。
不同批次試劑盒組分不可混用。
試劑盒運輸全程 2～8℃冷鏈，嚴禁高溫暴曬。
實驗步驟如下：
試劑盒室溫平衡 30min，梯度稀釋 MK 標準品，血清 / 細胞上清樣本稀釋預處理，標記酶標板各微孔用途。
空白孔添加樣本稀釋緩沖液，標準品孔加入梯度 MK 標準溶液，樣本孔加入待測樣本。
直接向全部反應孔加入酶標記抗體工作液，輕搖酶標板混勻孔內(nèi)液體。
封板密封后置于 37℃濕盒避光孵育 60min，維持穩(wěn)定孵育溫度。
撕開封板傾倒廢液，洗板液洗板 4 次，每次浸泡 35s，吸水紙拍干微孔。
避光加入 TMB 顯色液，37℃避光顯色 14min，顯色梯度分明即可終止。
加入終止液終止反應，酶標儀 450nm 檢測 OD 值，計算樣本 MK 中期因子濃度。
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關鍵字： 人中期因子;MK;ELISA試劑盒;
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