本試劑盒采用間接ELISA檢測原理，微孔板包被純化的類風濕因子特異性抗原，樣本中的人類風濕因子可與固相抗原特異性結(jié)合，洗板去除雜質(zhì)后加入酶標記抗人抗體，與結(jié)合的RF結(jié)合形成免疫復合物，經(jīng)底物顯色、終止液終止反應后，酶標儀檢測吸光度值，顯色深淺對應樣本中RF的含量，通過標準曲線換算即可實現(xiàn)對RF的定量檢測。
產(chǎn)品參數(shù)：
產(chǎn)品名稱 | 人類風濕因子(RF)ELISA試劑盒 | 貨號 | Y-E3144 RF |
英文名稱 | E1144 RF Elisa Kit | 規(guī)格 | 48T/96T |
?靈敏度：可檢出最低值≤2IU/mL
檢測范圍：5IU/mL–200IU/mL
反應時間：室溫孵育各步驟，總耗時 110min
保存條件：試劑盒 2–8℃儲存，酶結(jié)合物組分嚴禁反復凍融
顯色系統(tǒng)：可溶性 TMB 底物顯色
檢測波長：450nm，建議 570nm 做空白校正
標準曲線繪制：采用線性擬合方式，依據(jù)標準品梯度 OD 值建立定量曲線
注意事項：類風濕樣本建議新鮮采集，4℃保存不超 48h；洗板每孔浸泡 30s 再拍干
關鍵注意事項：
本試劑盒僅科研體外檢測，嚴禁臨床診斷使用。
全程避免試劑、板條強光直射，TMB 見光易失效。
移液器吸頭一次性使用，杜絕交叉污染；所有操作無酶、無熱源。
孵育溫度嚴格控制 37℃，溫度偏低會降低 OD 值、靈敏度下降。
洗板必須充分，殘液會造成非特異性結(jié)合，背景偏高。
終止后需快速讀數(shù)，放置過久吸光度會漂移，結(jié)果失真。
終止液含稀硫酸，避免接觸皮膚、眼睛，若不慎接觸大量清水沖洗。
實驗廢棄物按生物安全廢棄物規(guī)范處理。
不同批次試劑盒組分不可混用。
試劑盒運輸全程 2～8℃冷鏈，嚴禁高溫暴曬。
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實驗操作流程：
樣本制備：新鮮血清樣本避免溶血，用樣本稀釋液 1:10 稀釋待測樣本，渦旋混勻；
微孔加樣：包被微孔板每孔加入標準品、質(zhì)控品、待測稀釋樣本 100μL，空白孔只加稀釋液；
一步結(jié)合孵育：直接添加酶共軛試劑 60μL，封板后 37℃恒溫孵育 50min，讓抗原抗體與酶標物同步結(jié)合；
洗板除雜：倒掉孔中液體，洗滌液灌滿微孔，浸泡 20s 后拍干，循環(huán)洗板 6 次，濾紙吸干板底水分；
顯色反應：每孔加入顯色底物混合液 100μL，室溫避光放置 10min 顯色；
終止顯色：每孔滴加終止液 50μL，溶液由藍變黃即為反應終止；
結(jié)果測定：酶標儀 450nm 測 OD 值，對照標準曲線得出 RF 濃度數(shù)值。
關鍵字： 人類風濕因子;RF;ELISA試劑盒;
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