本試劑盒基于雙抗體夾心ELISA技術(shù)，將人生長激素釋放因子(GH-RF)特異性抗體固定于微孔板固相載體，加入樣本和標準品后，GH-RF抗原與固相抗體特異性結(jié)合，洗滌去除未結(jié)合物質(zhì)，再加入酶標記二抗形成夾心復(fù)合物，經(jīng)底物顯色、終止反應(yīng)后，通過酶標儀測定吸光度，吸光度數(shù)值與樣本中GH-RF含量呈正相關(guān)，可精準計算樣本中靶標蛋白濃度。
基本參數(shù)?：

產(chǎn)品名稱：人生長激素釋放因子(GH-RF)ELISA試劑盒

英文名稱：GH-RF  Elisa Kit
貨號：Y-E036

規(guī)格：48T/96T

靈敏度：最小檢出 3.4pg/mL

檢測范圍：20pg/mL ~ 900pg/mL

反應(yīng)時間：室溫結(jié)合孵育 85min，酶標二抗 58min，避光顯色 16min，總時長 2h39min

保存條件：整套試劑 2～8℃避光，終止液常溫密封存放無特殊避光要求

顯色系統(tǒng)：單組分 TMB 顯色體系，強酸終止反應(yīng)

檢測波長：450nm 與 650nm 雙波長校正讀數(shù)

標準曲線繪制：線性回歸法繪制標準曲線，7 個稀釋濃度點

注意事項：樣本采集后迅速冰浴處理，GH-RF 極易降解；洗板時防止孔內(nèi)液體殘留
通用注意事項：

樣本要求

血清、血漿避免嚴重溶血、脂血、黃疸；組織勻漿充分離心去除沉淀；樣本分裝凍存，反復(fù)凍融≥3 次會導(dǎo)致抗原降解，檢測值偏低。

溫度控制

孵育溫度嚴格 37℃，溫箱溫度波動、室溫過低會降低結(jié)合效率，背景升高、重復(fù)性變差。

避光操作

TMB 底物、酶結(jié)合物、神經(jīng)遞質(zhì) / 維生素類靶標樣本見光易氧化，顯色全程避光，試劑避光存放。

洗板規(guī)范

洗滌不充分會造成高背景、假陽性；拍干時使用干凈吸水紙，禁止交叉污染微孔。

污染防控

實驗耗材無 DNase、RNase、蛋白酶；槍頭一次性更換，標準品與樣本避免交叉加樣；底物液變色、出現(xiàn)沉淀不可使用。

安全防護

終止液含稀硫酸，具有腐蝕性，避免接觸皮膚、黏膜；實驗廢液集中收集中和后處理，不可直接傾倒。

失效判定

試劑盒超出有效期、試劑渾濁變色、標準品梯度無明顯顏色差異，均判定失效，禁止繼續(xù)實驗。

稀釋校正

樣本 OD 值高于最高標準孔時，必須稀釋重測，最終結(jié)果乘以稀釋倍數(shù)；低于最低檢測限標注 “低于試劑盒靈敏度”。

空白對照

空白孔吸光度應(yīng)極低，若空白孔 OD＞0.1，說明洗滌不充分或試劑污染，實驗作廢重做。

儲存禁忌

試劑盒不可冷凍結(jié)冰，冷凍會造成酶標抗體蛋白變性，直接導(dǎo)致試劑盒完全失效。
實驗步驟如下：

試劑盒全部試劑室溫回溫 27min，稀釋洗滌液，倍比稀釋 GH-RF 標準品，規(guī)劃酶標板孔位。

標準孔添加 50μL 各濃度標準液；樣本孔加 50μL 稀釋緩沖液 + 10μL 樣本；空白孔空置。

非空白孔加入酶結(jié)合抗體 100μL，封板膜密封，37℃孵育 60min。

撕膜棄液，洗滌液加滿每孔靜置 32s，甩干，洗板 5 次，拍干微孔板。

顯色 A、B 液每孔各 50μL，混勻后避光顯色 16min。

加入 50μL 終止液混勻終止顯色。

450nm 測定 OD 值，標準曲線計算 GH-RF 含量。
公司正在出售的產(chǎn)品：