本試劑盒采用競爭法酶聯(lián)免疫吸附檢測原理，酶標(biāo)板微孔包被大鼠GRH固相抗原，加入待測樣本和酶標(biāo)GRH抗體后，樣本中的游離GRH抗原與固相抗原競爭結(jié)合有限的酶標(biāo)抗體，GRH濃度越高，固相結(jié)合的酶活性越低，底物顯色越淺，終止反應(yīng)后檢測吸光度，結(jié)合標(biāo)準(zhǔn)曲線精準(zhǔn)定量大鼠樣本中GRH的含量水平。
基本參數(shù)?：
產(chǎn)品名稱：大鼠促生長激素釋放激素(GRH)ELISA試劑盒
英文名稱：GHRH ELISA Kit
貨號：Y-E1598
規(guī)格：48T/96T
靈敏度：最低檢測值0.06ng/mL，精準(zhǔn)檢測大鼠下丘腦微量GRH分泌量。
檢測范圍：0.2ng/mL - 9ng/mL，適配大鼠生長發(fā)育、代謝模型GRH檢測。
反應(yīng)時間：總時長100分鐘，樣本孵育35min、酶抗體孵育30min、顯色30min、終止讀數(shù)5min。
保存條件：2 - 8℃密封避光保存，所有試劑避免室溫長時間放置。
有效期：未開封有效期6個月，開封后2周內(nèi)使用最佳。
顯色系統(tǒng)：生長激素專用TMB顯色體系，顯色梯度均勻穩(wěn)定。
檢測波長：450nm主波長，620nm參比波長。
標(biāo)準(zhǔn)曲線繪制：五梯度標(biāo)準(zhǔn)品擬合，四參數(shù)方程，R2≥0.994。
特異性：特異性結(jié)合大鼠GRH，與其他下丘腦釋放激素?zé)o交叉反應(yīng)。
重復(fù)性：板內(nèi)CV≤3.5%，板間CV≤5.5%，重復(fù)性優(yōu)異。
注意事項：生長激素樣本需低溫分裝保存，杜絕反復(fù)凍融；孵育溫度、時間嚴(yán)格標(biāo)準(zhǔn)化；洗板徹底，保證檢測精準(zhǔn)度。
關(guān)鍵注意事項：
實驗前需仔細(xì)閱讀對應(yīng)試劑盒的說明書，不同試劑盒的孵育時間、加樣量可能存在差異
所有試劑需按要求儲存，未用完的試劑需密封后放回規(guī)定溫度（通常2-8℃或-20℃）
避免試劑污染，不同組分的移液器槍頭需分開使用
洗板時需確保每孔都被洗滌液覆蓋，防止出現(xiàn)假陽性結(jié)果
顯色過程需避光，避免陽光直射影響結(jié)果
實驗步驟如下：
GRH 標(biāo)準(zhǔn)品梯度稀釋，試劑盒室溫平衡 30min，排布酶標(biāo)板孔位；
各微孔添加 50μL 梯度標(biāo)準(zhǔn)品或大鼠垂體組織上清，空白孔填充稀釋緩沖液；
加入 100μL 辣根酶標(biāo)記抗 GRH 檢測抗體，覆膜封閉板面；
37℃避光孵育 64min，一步同步形成免疫復(fù)合物；
洗滌緩沖液浸泡 30s，吸干殘留液體，重復(fù)洗滌 6 次；
避光添加顯色底物混合液 100μL，37℃避光反應(yīng) 13min；
終止液混勻，450nm 讀取 OD 值，對照曲線換算 GRH 濃度。
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關(guān)鍵字： 大鼠促生長激素釋放激素;GRH;ELISA試劑盒;
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