本試劑盒采用競(jìng)爭(zhēng)法ELISA檢測(cè)原理,微孔板固定大鼠CRH固相抗原,反應(yīng)過程中待測(cè)樣本中的游離CRH抗原與固相CRH抗原競(jìng)爭(zhēng)結(jié)合酶標(biāo)記特異性抗體,樣本中CRH含量越高,固相顯色信號(hào)強(qiáng)度越低,終止反應(yīng)后檢測(cè)吸光度,對(duì)照標(biāo)準(zhǔn)曲線的對(duì)應(yīng)關(guān)系,精準(zhǔn)定量大鼠樣本中CRH的濃度。
基本參數(shù)?:

產(chǎn)品名稱:大鼠促腎上皮質(zhì)激素釋放激素(CRH)ELISA試劑盒
英文名稱:CRH ELISA Kit
貨號(hào):Y-E1429
規(guī)格:48T/96T
靈敏度:最低檢測(cè)濃度0.04ng/mL,適配大鼠下丘腦應(yīng)激相關(guān)微量CRH檢測(cè)。
檢測(cè)范圍:0.1ng/mL - 7ng/mL,適用于大鼠下丘腦、血清、腦脊液樣本。
反應(yīng)時(shí)間:總時(shí)長(zhǎng)105分鐘,樣本孵育40min、酶結(jié)合物孵育30min、顯色30min、終止讀數(shù)5min。
保存條件:2 - 8℃避光密封保存,神經(jīng)內(nèi)分泌試劑單獨(dú)存放,防潮防污染。
有效期:未開封有效期6個(gè)月,溶解標(biāo)準(zhǔn)品當(dāng)日使用。
顯色系統(tǒng):高穩(wěn)定TMB顯色體系,低濃度樣本顯色清晰。
檢測(cè)波長(zhǎng):450nm主波長(zhǎng),630nm參比波長(zhǎng)。
標(biāo)準(zhǔn)曲線繪制:五梯度標(biāo)準(zhǔn)品擬合,R2≥0.994。
特異性:特異性結(jié)合大鼠CRH,與GRH、TRH等釋放激素?zé)o交叉反應(yīng)。
重復(fù)性:板內(nèi)CV≤3.2%,板間CV≤5.2%,重復(fù)性良好。
注意事項(xiàng):應(yīng)激模型樣本需快速采集固定,防止CRH降解;孵育保持恒溫恒濕;讀數(shù)前震蕩混勻,保證孔內(nèi)液體均一。
儲(chǔ)存與有效期:

未開封整套試劑盒:2~8℃避光冷藏,禁止冷凍;有效期 12 個(gè)月。
開封后保存
剩余酶標(biāo)板條:自封袋密封,內(nèi)置干燥劑 2~8℃避光;1 個(gè)月內(nèi)用完。
HRP 酶結(jié)合物、TMB 底物:避光 2~8℃,避免光照失效。
濃縮洗滌液:2~30℃常溫保存,結(jié)晶溫水溶解不影響效果。
復(fù)溶后標(biāo)準(zhǔn)品:分裝 - 20℃凍存,避免反復(fù)凍融,1 個(gè)月內(nèi)使用。
過期試劑禁止使用。
實(shí)驗(yàn)步驟如下:

CRH 凍干標(biāo)準(zhǔn)品梯度稀釋,試劑盒室溫平衡 28min,標(biāo)記酶標(biāo)板所有微孔;
每微孔添加 50μL 標(biāo)準(zhǔn)品或大鼠腦組織勻漿上清,空白孔填充稀釋緩沖液;
快速加入 100μL HRP 標(biāo)記抗 CRH 特異性抗體,密封酶標(biāo)板;
37℃避光孵育 62min,一步完成免疫結(jié)合;
洗板液浸泡微孔 35s,拍干,連續(xù)洗滌 6 次;
避光添加顯色底物混合液 100μL,37℃避光反應(yīng) 15min;
終止液混勻微孔液體,450nm 讀數(shù),擬合標(biāo)準(zhǔn)曲線換算 CRH 濃度。
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關(guān)鍵字: 大鼠促腎上皮質(zhì)激素釋放激素;CRH;ELISA試劑盒;
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