本試劑盒依托雙抗體夾心酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)原理，微孔板預(yù)先包被抗大鼠ACTH特異性捕獲抗體，加入標(biāo)準(zhǔn)品與大鼠生物樣本后，樣本中的ACTH抗原被固相抗體特異性捕獲，洗滌去除游離雜質(zhì)與未結(jié)合蛋白，加入酶標(biāo)記的ACTH檢測抗體形成夾心免疫復(fù)合物，底物顯色后吸光度與ACTH含量正相關(guān)，終止反應(yīng)后上機(jī)讀數(shù)完成定量檢測。
基本參數(shù)?：
產(chǎn)品名稱：大鼠促腎上腺皮質(zhì)激素(ACTH)ELISA試劑盒
英文名稱：ACTH ELISA Kit
貨號：Y-E1599
規(guī)格：48T/96T
靈敏度：最低檢出限0.1pg/mL，可精準(zhǔn)檢測大鼠垂體微量ACTH激素水平。
檢測范圍：0.5pg/mL - 50pg/mL，覆蓋大鼠正常及應(yīng)激狀態(tài)下ACTH表達(dá)區(qū)間。
反應(yīng)時(shí)間：總時(shí)長95分鐘，樣本孵育35min、酶孵育30min、顯色25min、終止讀數(shù)5min。
保存條件：2 - 8℃避光冷藏，激素抗體試劑禁止冷凍、暴曬。
有效期：原裝未開封有效期6個(gè)月，開封后1個(gè)月內(nèi)用完。
顯色系統(tǒng)：垂體激素專用顯色系統(tǒng)，背景干擾極低。
檢測波長：450nm標(biāo)準(zhǔn)檢測波長。
標(biāo)準(zhǔn)曲線繪制：六梯度標(biāo)準(zhǔn)品四參數(shù)擬合，R2≥0.995。
特異性：特異性識(shí)別大鼠ACTH，與其他腎上腺調(diào)節(jié)激素?zé)o交叉反應(yīng)。
重復(fù)性：板內(nèi)CV≤3.8%，板間CV≤5.8%，數(shù)據(jù)可靠。
注意事項(xiàng)：樣本采集后立即低溫保存，ACTH極易降解；避免樣本溶血、污染；實(shí)驗(yàn)操作全程統(tǒng)一標(biāo)準(zhǔn)，減少人為誤差。
試劑盒組成：
預(yù)包被抗體/抗原微孔板 96孔/48孔 固定捕獲抗體/抗原，結(jié)合目標(biāo)物
標(biāo)準(zhǔn)品 6支/套 制備標(biāo)準(zhǔn)曲線，定量檢測依據(jù)
生物素標(biāo)記抗體/抗原 1瓶 識(shí)別并結(jié)合目標(biāo)物，提供酶結(jié)合位點(diǎn)
辣根過氧化物酶（HRP）標(biāo)記親和素 1瓶 與生物素結(jié)合，催化底物顯色
底物溶液A、B 各1瓶 混合后作為酶促反應(yīng)底物，產(chǎn)生顏色變化
終止液 1瓶 終止酶促反應(yīng)，穩(wěn)定顯色結(jié)果
濃縮洗滌液 1瓶 清洗微孔板，去除未結(jié)合物質(zhì)
封板膜 2張 孵育過程中防止污染和揮發(fā)
實(shí)驗(yàn)步驟如下：
ACTH 標(biāo)準(zhǔn)品復(fù)溶配制梯度，試劑盒室溫平衡 31min，劃分酶標(biāo)板標(biāo)準(zhǔn)、樣本、空白孔；
標(biāo)準(zhǔn)孔加 50μL 梯度標(biāo)準(zhǔn)品，樣本孔加入大鼠血漿 50μL，空白孔補(bǔ)稀釋液；
全部微孔加入 100μL 酶標(biāo)記抗 ACTH 抗體，封板膜密封；
37℃恒溫孵育 67min，一步共孵育抗原標(biāo)記抗體結(jié)合；
洗滌液浸泡微孔 40s，徹底拍干，洗板 5 次；
避光加入顯色底物 A、B 各 50μL，37℃避光顯色 16min；
終止液終止顯色，450nm 檢測吸光度，計(jì)算 ACTH 含量。
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關(guān)鍵字： 大鼠促腎上腺皮質(zhì)激素;ACTH;ELISA試劑盒;
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