本試劑盒采用雙抗體夾心ELISA檢測(cè)原理，酶標(biāo)板預(yù)先包被人FcαRⅠ特異性單克隆抗體，待測(cè)樣本中的靶標(biāo)蛋白與固相抗體特異性結(jié)合，加入辣根過(guò)氧化物酶標(biāo)記的對(duì)應(yīng)檢測(cè)抗體，形成抗體-抗原-酶標(biāo)抗體免疫復(fù)合物，洗滌去除未結(jié)合雜質(zhì)，通過(guò)酶促底物顯色反應(yīng)產(chǎn)生特異性顏色變化，顯色強(qiáng)度與樣本中FcαRⅠ含量正相關(guān)，經(jīng)吸光度檢測(cè)和標(biāo)準(zhǔn)曲線換算實(shí)現(xiàn)定量檢測(cè)。
產(chǎn)品參數(shù)：
產(chǎn)品名稱 | 人免疫球蛋白A Fc段受體Ⅰ(FcαRⅠ/CD89)ELISA試劑盒 | 貨號(hào) | Y-E007 |
英文名稱 | FcαRⅠ Elisa Kit | 規(guī)格 | 48T/96T |
?靈敏度：0.48 pg/mL
檢測(cè)范圍：3pg/mL～120pg/mL
反應(yīng)時(shí)間：37℃樣本孵育 70min，二抗 42min，顯色 14min，合計(jì) 126min
保存條件：整體 2～8℃冷藏，終止液常溫密閉存放
顯色系統(tǒng)：TMB 雙液混合顯色
檢測(cè)波長(zhǎng)：450nm，參比 620nm
標(biāo)準(zhǔn)曲線繪制：7 點(diǎn)梯度，四參數(shù) Logistic 回歸建模
注意事項(xiàng)：洗板步驟每孔洗液加注量不少于 300μL，洗板不少于 5 次
儲(chǔ)存與有效期：
未開封整套試劑盒：2～8℃避光冷藏，禁止冷凍；有效期 12 個(gè)月。
開封后保存
剩余酶標(biāo)板條：自封袋密封，內(nèi)置干燥劑 2～8℃避光；1 個(gè)月內(nèi)用完。
HRP 酶結(jié)合物、TMB 底物：避光 2～8℃，避免光照失效。
濃縮洗滌液：2～30℃常溫保存，結(jié)晶溫水溶解不影響效果。
復(fù)溶后標(biāo)準(zhǔn)品：分裝 - 20℃凍存，避免反復(fù)凍融，1 個(gè)月內(nèi)使用。
過(guò)期試劑禁止使用。
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實(shí)驗(yàn)操作流程：
樣本制備：細(xì)胞裂解液樣本 12000rpm 離心 15min 取上清，稀釋待測(cè)樣本；配制 CD89 標(biāo)準(zhǔn)品梯度濃度。
板孔點(diǎn)樣：對(duì)應(yīng)微孔加入標(biāo)準(zhǔn)品、待測(cè)樣品、空白對(duì)照各 100μL，記錄布局。
一步法酶抗添加：所有孔加入 HRP 標(biāo)記 CD89 抗體 100μL，封板密封。
免疫孵育：37℃避光孵育 60min，完成抗原與雙抗體夾心結(jié)合。
洗板除雜：棄液后洗滌液浸泡每孔 30s，倒扣拍干，重復(fù)洗板 5 次。
底物顯色：加入 TMB 顯色液，室溫避光反應(yīng) 17min。
終止定量：終止液終止反應(yīng)，450nm 測(cè)吸光度，換算樣本 FcαRⅠ 濃度。
關(guān)鍵字： 人免疫球蛋白A Fc段受體Ⅰ;FcαRⅠ/CD89;ELISA試劑盒;
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