本試劑盒依托雙抗體夾心酶聯(lián)免疫吸附原理，酶標板預(yù)包被人TdT特異性單克隆抗體，孵育過程中樣本中的末端脫氧核苷酸轉(zhuǎn)移酶與固相抗體特異性結(jié)合，加入酶標記檢測抗體形成免疫復(fù)合物，充分洗滌后進行底物顯色，顯色深淺與樣本中TdT含量成正比，通過酶標儀讀數(shù)和標準曲線換算完成定量檢測。
產(chǎn)品參數(shù)：

?靈敏度：0.31 pg/mL

檢測范圍：2.2pg/mL～98pg/mL

反應(yīng)時間：樣本孵育 90min，酶試劑 43min，顯色 16min，總 149min

保存條件：2～8℃避光，核酸相關(guān)組分避免高溫環(huán)境

顯色系統(tǒng)：TMB 單液顯色終止

檢測波長：450nm

標準曲線繪制：7 梯度標準品，非線性擬合曲線

注意事項：實驗全程無 DNase 污染，槍頭無核酸酶殘留
實驗前準備工作：

1. 試劑平衡與稀釋

試劑盒所有組分（酶標板、標準品、酶結(jié)合物、底物、洗滌濃縮液、樣本稀釋液、終止液）從 2~8℃取出，室溫（20~25℃）放置平衡 30min，嚴禁直接低溫操作。

濃縮洗滌液配制：按標簽標注比例用去離子純水稀釋（常見 20× 濃縮液：1 份濃縮液 + 19 份純水），混勻備用，現(xiàn)配現(xiàn)用。

標準品復(fù)溶 / 梯度稀釋：

凍干標準品加入配套標準品稀釋液充分溶解，室溫靜置 10min，輕柔吹打混勻；

按說明書梯度倍比稀釋出 5~7 個濃度梯度標準品，單獨標記，剩余原液分裝 - 20℃避光保存，避免反復(fù)凍融。

待測樣本預(yù)處理：血清 / 血漿、組織勻漿、細胞上清用樣本稀釋液適當稀釋，渾濁樣本 12000r/min 離心 10min 取上清；溶血、脂血嚴重樣本棄用。

2. 耗材與設(shè)備準備

設(shè)備：恒溫 37℃孵育箱、酶標儀（450nm 主波長，630nm 參比）、多通道移液槍、吸水濾紙、洗板機（或手動洗板槽）、封板膜、離心管。

耗材無核酸酶、無熱源、無蛋白污染，移液槍提前校準。

取出本次實驗所需酶標板條，剩余未使用板條裝入鋁箔密封袋，加干燥劑 2~8℃避光保存。

3. 孔位規(guī)劃標記

酶標板做好分區(qū)標記：空白孔、零標準孔、梯度標準品孔、待測樣本孔、復(fù)孔（所有樣本、標準品建議設(shè)置雙復(fù)孔降低誤差）。

公司正在出售的產(chǎn)品：

實驗操作流程：

樣本處理：細胞裂解上清 12000rpm 離心 12min，稀釋樣本；梯度配制 TdT 標準品系列濃度。

上板加樣：酶標板對應(yīng)孔加入標準品、待測樣品、空白對照 100μL。

一步共加酶抗：每孔加入 HRP 標記 TdT 抗體 100μL，密封板膜。

恒溫孵育：37℃避光孵育 63min。

洗板流程：倒掉廢液，洗液浸泡 25s 拍干，洗板 5 次。

TMB 顯色：添加顯色 A、B 液各 50μL，避光顯色 13min。

終止讀數(shù)：終止液終止顯色，酶標儀 450nm 測值，標準曲線定量 TdT。