本試劑盒以雙抗體夾心ELISA法為檢測核心原理，固相微孔板包被人GROβ/CXCL2/MGSA特異性抗體，加入待測樣本與梯度標(biāo)準(zhǔn)品后，樣本中的靶標(biāo)抗原與固相抗體發(fā)生特異性免疫結(jié)合，洗滌去除游離雜質(zhì)后加入酶標(biāo)記配對抗體，構(gòu)建夾心免疫復(fù)合物，經(jīng)酶促顯色、終止反應(yīng)后檢測吸光度，數(shù)值大小對應(yīng)樣本中靶標(biāo)蛋白的含量，通過標(biāo)準(zhǔn)曲線可精準(zhǔn)定量。
基本參數(shù)?：
產(chǎn)品名稱：人生長調(diào)節(jié)致癌基因β/黑素瘤生長刺激因子(GROβ/CXCL2/MGSA)ELISA試劑盒
英文名稱：GROβ/MGSA Elisa Kit
貨號：Y-E234
規(guī)格：48T/96T
靈敏度：最低可檢出 2.5pg/mL
檢測范圍：14pg/mL ~ 820pg/mL
反應(yīng)時間：樣本孵育 70min，酶結(jié)合物 53min，避光顯色 22min，總時長 2h25min
保存條件：試劑盒 2-8℃避光保存，底物液嚴(yán)禁光照，洗滌液出現(xiàn)結(jié)晶溫水化開即可
顯色系統(tǒng)：預(yù)裝即用 TMB 顯色液，酸性終止液終止
檢測波長：450nm 主波長，630nm 參比波長
標(biāo)準(zhǔn)曲線繪制：半對數(shù)坐標(biāo)擬合標(biāo)準(zhǔn)曲線，6 個標(biāo)準(zhǔn)品稀釋梯度
注意事項：EDTA 血漿樣本可檢測，檸檬酸鈉抗凝樣本干擾較大不推薦使用
關(guān)鍵注意事項：
本試劑盒僅科研體外檢測，嚴(yán)禁臨床診斷使用。
全程避免試劑、板條強光直射，TMB 見光易失效。
移液器吸頭一次性使用，杜絕交叉污染；所有操作無酶、無熱源。
孵育溫度嚴(yán)格控制 37℃，溫度偏低會降低 OD 值、靈敏度下降。
洗板必須充分，殘液會造成非特異性結(jié)合，背景偏高。
終止后需快速讀數(shù)，放置過久吸光度會漂移，結(jié)果失真。
終止液含稀硫酸，避免接觸皮膚、眼睛，若不慎接觸大量清水沖洗。
實驗廢棄物按生物安全廢棄物規(guī)范處理。
不同批次試劑盒組分不可混用。
試劑盒運輸全程 2～8℃冷鏈，嚴(yán)禁高溫暴曬。
實驗步驟如下：
試劑盒組分室溫平衡 24min，稀釋洗滌緩沖液，逐級稀釋 GROβ 標(biāo)準(zhǔn)品，標(biāo)記孔位類別。
標(biāo)準(zhǔn)孔加入 50μL 梯度標(biāo)準(zhǔn)液；樣本孔加 50μL 稀釋液 + 10μL 樣本；空白孔無加樣。
檢測孔加入 HRP 標(biāo)記抗 GROβ 抗體 100μL，封板 37℃孵育 54min。
棄液洗板，每孔注滿洗滌液靜置 30s，甩干重復(fù) 5 次，拍干微孔板。
顯色雙液各 50μL 加入每孔，混勻避光顯色 14min。
加入終止液 50μL 終止并混勻。
酶標(biāo)儀 450nm 測值，計算樣本 GROβ 含量。
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關(guān)鍵字： 人生長調(diào)節(jié)致癌基因β/黑素瘤生長刺激因子;GROβ/CXCL2/MGSA;ELISA試劑盒;
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