本試劑盒運(yùn)用經(jīng)典間接ELISA檢測原理,微孔板包被高純度人組蛋白抗原,待測樣本中的抗組蛋白抗體(AHA)與固相組蛋白抗原發(fā)生特異性免疫結(jié)合,洗板去除游離雜質(zhì)后,加入辣根過氧化物酶標(biāo)記的抗人二抗孵育結(jié)合,底物催化顯色后測定吸光度,結(jié)合標(biāo)準(zhǔn)曲線定量檢測樣本中AHA抗體含量。
產(chǎn)品參數(shù):
產(chǎn)品名稱 | 人抗組蛋白抗體(AHA)ELISA試劑盒 | 貨號 | Y-E466 |
英文名稱 | AHA Elisa Kit | 規(guī)格 | 48T/96T |
?靈敏度:檢出下限 0.5 RU/mL
檢測范圍:0.4 RU/mL ~ 25 RU/mL
反應(yīng)時(shí)間:孵育 90min,二抗 50min,顯色 20min
保存條件:2~8℃保存,開封后試劑 1 個(gè)月有效期
顯色系統(tǒng):TMB 顯色底物體系
檢測波長:450nm
標(biāo)準(zhǔn)曲線繪制:梯度標(biāo)準(zhǔn)品測定吸光值,外標(biāo)法繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算濃度
注意事項(xiàng):類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎樣本易出現(xiàn)非特異性反應(yīng),建議平行復(fù)孔檢測
試劑盒組成:
預(yù)包被抗體/抗原微孔板 96孔/48孔 固定捕獲抗體/抗原,結(jié)合目標(biāo)物
標(biāo)準(zhǔn)品 6支/套 制備標(biāo)準(zhǔn)曲線,定量檢測依據(jù)
生物素標(biāo)記抗體/抗原 1瓶 識別并結(jié)合目標(biāo)物,提供酶結(jié)合位點(diǎn)
辣根過氧化物酶(HRP)標(biāo)記親和素 1瓶 與生物素結(jié)合,催化底物顯色
底物溶液A、B 各1瓶 混合后作為酶促反應(yīng)底物,產(chǎn)生顏色變化
終止液 1瓶 終止酶促反應(yīng),穩(wěn)定顯色結(jié)果
濃縮洗滌液 1瓶 清洗微孔板,去除未結(jié)合物質(zhì)
封板膜 2張 孵育過程中防止污染和揮發(fā)
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實(shí)驗(yàn)操作流程:
試劑室溫復(fù)溫 26min,截取實(shí)驗(yàn)用微孔條,做好孔位標(biāo)記分類。
樣本孔與標(biāo)準(zhǔn)孔加入對應(yīng)液體 50μL,同步添加酶標(biāo)記工作液 50μL,封板密封。
輕搖混勻后 37℃孵育 58min。
去膜倒液,洗液浸泡 28s,拍干,洗板 5 次。
顯色底物 A、B 每孔 50μL,避光顯色 14min。
終止液 50μL 加入各孔終止顯色。
450nm 讀取 OD 值,計(jì)算 AHA 抗體滴度。
關(guān)鍵字: 人抗組蛋白抗體;AHA;ELISA試劑盒;
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