本試劑盒采用經(jīng)典雙抗體夾心ELISA檢測(cè)原理，酶標(biāo)板包被UPP1特異性抗體，待測(cè)樣本中的尿嘧啶核苷磷酸化酶1抗原與固相抗體特異性結(jié)合，加入酶標(biāo)記配對(duì)抗體形成夾心免疫結(jié)構(gòu)，充分洗滌后進(jìn)行底物顯色反應(yīng)，顯色深淺與樣本中UPP1含量成正比，通過酶標(biāo)儀讀數(shù)完成定量檢測(cè)。
產(chǎn)品參數(shù)：
產(chǎn)品名稱 | 人尿嘧啶核苷磷酸化酶1(UPP1)ELISA試劑盒 | 貨號(hào) | Y-E892 |
英文名稱 | UPP1 Elisa Kit | 規(guī)格 | 48T/96T |
?靈敏度：0.49 ng/L
檢測(cè)范圍：5.5ng/L～295ng/L
反應(yīng)時(shí)間：封閉 30min，樣本 80min，二抗 44min，顯色 17min，總 171min
保存條件：未開封試劑盒 2-8℃，開封后 1 個(gè)月內(nèi)用完
顯色系統(tǒng)：A/B 底物液混合顯色
檢測(cè)波長(zhǎng)：450nm+600nm 雙波長(zhǎng)校正
標(biāo)準(zhǔn)曲線繪制：7 個(gè)濃度梯度，線性回歸繪制曲線
注意事項(xiàng)：核酸類樣本操作避免外源酶污染
試劑盒組成：
預(yù)包被抗體/抗原微孔板 96孔/48孔 固定捕獲抗體/抗原，結(jié)合目標(biāo)物
標(biāo)準(zhǔn)品 6支/套 制備標(biāo)準(zhǔn)曲線，定量檢測(cè)依據(jù)
生物素標(biāo)記抗體/抗原 1瓶 識(shí)別并結(jié)合目標(biāo)物，提供酶結(jié)合位點(diǎn)
辣根過氧化物酶（HRP）標(biāo)記親和素 1瓶 與生物素結(jié)合，催化底物顯色
底物溶液A、B 各1瓶 混合后作為酶促反應(yīng)底物，產(chǎn)生顏色變化
終止液 1瓶 終止酶促反應(yīng)，穩(wěn)定顯色結(jié)果
濃縮洗滌液 1瓶 清洗微孔板，去除未結(jié)合物質(zhì)
封板膜 2張 孵育過程中防止污染和揮發(fā)
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實(shí)驗(yàn)操作流程：
預(yù)處理：稀釋濃縮洗滌液，梯度稀釋 UPP1 標(biāo)準(zhǔn)品，待測(cè)上清樣本混勻離心。
板孔加樣：各微孔加入標(biāo)準(zhǔn)品、待測(cè)樣本、空白對(duì)照 100μL，無氣泡加樣。
一步法酶抗加入：每孔加入 HRP 標(biāo)記 UPP1 抗體 100μL，密封封板膜。
恒溫結(jié)合孵育：37℃避光孵育 58min。
洗板操作：倒掉廢液，洗液浸泡 35s 拍干，循環(huán)洗板 5 次。
TMB 顯色：加入顯色底物，室溫暗處顯色 18min。
終止檢測(cè)：加終止液終止反應(yīng)，450nm 測(cè)定 OD 值，標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算 UPP1 濃度。
關(guān)鍵字： 人尿嘧啶核苷磷酸化酶1;UPP1;ELISA試劑盒;
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