本試劑盒基于雙抗體夾心酶聯(lián)免疫吸附原理,酶標(biāo)板微孔預(yù)先包被T-TM復(fù)合物特異性抗體,待測樣本中的凝血酶血栓調(diào)節(jié)蛋白復(fù)合物與固相抗體特異性結(jié)合,加入酶標(biāo)記檢測抗體形成穩(wěn)定免疫復(fù)合物,洗滌去除非特異性結(jié)合成分后酶促顯色,顯色強度與復(fù)合物含量正相關(guān),通過標(biāo)準(zhǔn)曲線擬合實現(xiàn)定量檢測。
產(chǎn)品參數(shù):
產(chǎn)品名稱 | 人凝血酶血栓調(diào)節(jié)蛋白復(fù)合物(T-TM)ELISA試劑盒 | 貨號 | Y-E2837 |
英文名稱 | T-TM ELISA Kit | 規(guī)格 | 48T/96T |
?靈敏度:0.15 ng/L
檢測范圍:2ng/L~140ng/L
反應(yīng)時間:樣本孵育 128min,二抗 63min,顯色 21min,總 212min
保存條件:2~8℃冷藏,凝血類樣本試劑避免室溫久放
顯色系統(tǒng):OPD 底物顯色
檢測波長:492nm
標(biāo)準(zhǔn)曲線繪制:8 梯度復(fù)合物標(biāo)準(zhǔn)品,四參數(shù)擬合曲線
注意事項:血漿采血后 30min 內(nèi)分離,凝血復(fù)合物極易體外生成干擾結(jié)果
試劑盒組成:
預(yù)包被抗體/抗原微孔板 96孔/48孔 固定捕獲抗體/抗原,結(jié)合目標(biāo)物
標(biāo)準(zhǔn)品 6支/套 制備標(biāo)準(zhǔn)曲線,定量檢測依據(jù)
生物素標(biāo)記抗體/抗原 1瓶 識別并結(jié)合目標(biāo)物,提供酶結(jié)合位點
辣根過氧化物酶(HRP)標(biāo)記親和素 1瓶 與生物素結(jié)合,催化底物顯色
底物溶液A、B 各1瓶 混合后作為酶促反應(yīng)底物,產(chǎn)生顏色變化
終止液 1瓶 終止酶促反應(yīng),穩(wěn)定顯色結(jié)果
濃縮洗滌液 1瓶 清洗微孔板,去除未結(jié)合物質(zhì)
封板膜 2張 孵育過程中防止污染和揮發(fā)
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實驗操作流程:
預(yù)處理:稀釋洗滌液,梯度稀釋 T-TM 復(fù)合物標(biāo)準(zhǔn)品,血漿樣本抗凝后離心取上清。
板孔加樣:各微孔加入標(biāo)準(zhǔn)品、待測血漿上清、空白對照 100μL。
一步共孵加酶抗:每孔加入 HRP 標(biāo)記特異性檢測抗體 100μL,封板輕搖。
恒溫避光孵育:37℃孵育 52min。
洗板操作:倒掉廢液,洗液浸泡 25s 拍干,洗板 5 次。
顯色反應(yīng):加入顯色混合底物,暗處顯色 16min。
終止檢測:終止液終止酶促反應(yīng),450nm 測定吸光值,定量 T-TM 復(fù)合物濃度。
關(guān)鍵字: 人凝血酶血栓調(diào)節(jié)蛋白復(fù)合物;T-TM;ELISA試劑盒;
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