本試劑盒采用雙抗體夾心ELISA檢測原理,酶標(biāo)板微孔固定VCL特異性單克隆抗體,待測樣本中的紐蛋白與固相抗體特異性結(jié)合,加入酶標(biāo)記配對抗體形成夾心免疫結(jié)構(gòu),洗滌去除游離雜質(zhì)后催化底物顯色,終止后檢測吸光度,結(jié)合標(biāo)準曲線定量測定樣本中VCL的含量。
產(chǎn)品參數(shù):
產(chǎn)品名稱 | 人紐蛋白(VCL)ELISA試劑盒 | 貨號 | Y-E2570 |
英文名稱 | VCL ELISA Kit | 規(guī)格 | 48T/96T |
?靈敏度:0.68 pg/mL
檢測范圍:3pg/mL~102pg/mL
反應(yīng)時間:封閉 31min,樣本 83min,酶結(jié)合物 41min,顯色 16min,總 171min
保存條件:2~8℃避光,洗滌濃縮液室溫存放
顯色系統(tǒng):A/B 底物混合顯色,稀硫酸終止
檢測波長:450nm+600nm 雙波長校正
標(biāo)準曲線繪制:8 點梯度濃度,非線性擬合標(biāo)準曲線
注意事項:貼壁細胞裂解前棄去培養(yǎng)基,避免培養(yǎng)基蛋白干擾
儲存與有效期:
未開封整套試劑盒:2~8℃避光冷藏,禁止冷凍;有效期 12 個月。
開封后保存
剩余酶標(biāo)板條:自封袋密封,內(nèi)置干燥劑 2~8℃避光;1 個月內(nèi)用完。
HRP 酶結(jié)合物、TMB 底物:避光 2~8℃,避免光照失效。
濃縮洗滌液:2~30℃常溫保存,結(jié)晶溫水溶解不影響效果。
復(fù)溶后標(biāo)準品:分裝 - 20℃凍存,避免反復(fù)凍融,1 個月內(nèi)使用。
過期試劑禁止使用。
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實驗操作流程:
樣本前處理:細胞裂解液高速離心去除殘渣,稀釋待測樣本;梯度稀釋 VCL 標(biāo)準品溶液。
板孔點樣:各微孔依次加入標(biāo)準品、待測樣本、空白對照液 100μL。
酶標(biāo)抗體共加:每孔加入酶標(biāo)記抗 VCL 抗體 100μL,封板密封。
孵育反應(yīng):37℃避光孵育 64min。
洗板除雜:棄凈孔內(nèi)液體,洗液浸泡 40s 拍干,洗板 5 次。
避光顯色:加入顯色混合底物,室溫顯色 14min。
終止檢測:終止液終止反應(yīng),450nm 測定吸光度,計算 VCL 蛋白表達量。
關(guān)鍵字: 人紐蛋白;VCL;ELISA試劑盒;
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