本試劑盒依托雙抗體夾心酶聯(lián)免疫吸附檢測(cè)原理，酶標(biāo)板微孔預(yù)包被FSA特異性抗體，孵育過(guò)程中樣本中的胚胎性硫糖蛋白抗原與抗體特異性結(jié)合，加入酶標(biāo)記檢測(cè)抗體形成免疫復(fù)合物，充分洗滌后進(jìn)行底物顯色，顯色深淺與樣本中FSA濃度成正比，通過(guò)標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)換算完成定量檢測(cè)。
產(chǎn)品參數(shù)：

?靈敏度：1.5 μg/L

檢測(cè)范圍：8μg/L～620μg/L

反應(yīng)時(shí)間：37℃孵育 93min，二抗 45min，顯色 14min，總 152min

保存條件：2～8℃避光密封，底物液避光保存

顯色系統(tǒng)：TMB 雙組份混合顯色

檢測(cè)波長(zhǎng)：450nm，參比 630nm

標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)繪制：6 梯度標(biāo)準(zhǔn)品，線(xiàn)性回歸繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)

注意事項(xiàng)：腹水樣本需稀釋后檢測(cè)，高濃度抗原易鉤狀效應(yīng)
實(shí)驗(yàn)前準(zhǔn)備工作：

1. 試劑平衡與稀釋

試劑盒所有組分（酶標(biāo)板、標(biāo)準(zhǔn)品、酶結(jié)合物、底物、洗滌濃縮液、樣本稀釋液、終止液）從 2~8℃取出，室溫（20~25℃）放置平衡 30min，嚴(yán)禁直接低溫操作。

濃縮洗滌液配制：按標(biāo)簽標(biāo)注比例用去離子純水稀釋?zhuān)ǔＲ?jiàn) 20× 濃縮液：1 份濃縮液 + 19 份純水），混勻備用，現(xiàn)配現(xiàn)用。

標(biāo)準(zhǔn)品復(fù)溶 / 梯度稀釋?zhuān)?/span>

凍干標(biāo)準(zhǔn)品加入配套標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液充分溶解，室溫靜置 10min，輕柔吹打混勻；

按說(shuō)明書(shū)梯度倍比稀釋出 5~7 個(gè)濃度梯度標(biāo)準(zhǔn)品，單獨(dú)標(biāo)記，剩余原液分裝 - 20℃避光保存，避免反復(fù)凍融。

待測(cè)樣本預(yù)處理：血清 / 血漿、組織勻漿、細(xì)胞上清用樣本稀釋液適當(dāng)稀釋?zhuān)瑴啙針颖?12000r/min 離心 10min 取上清；溶血、脂血嚴(yán)重樣本棄用。

2. 耗材與設(shè)備準(zhǔn)備

設(shè)備：恒溫 37℃孵育箱、酶標(biāo)儀（450nm 主波長(zhǎng)，630nm 參比）、多通道移液槍、吸水濾紙、洗板機(jī)（或手動(dòng)洗板槽）、封板膜、離心管。

耗材無(wú)核酸酶、無(wú)熱源、無(wú)蛋白污染，移液槍提前校準(zhǔn)。

取出本次實(shí)驗(yàn)所需酶標(biāo)板條，剩余未使用板條裝入鋁箔密封袋，加干燥劑 2~8℃避光保存。

3. 孔位規(guī)劃標(biāo)記

酶標(biāo)板做好分區(qū)標(biāo)記：空白孔、零標(biāo)準(zhǔn)孔、梯度標(biāo)準(zhǔn)品孔、待測(cè)樣本孔、復(fù)孔（所有樣本、標(biāo)準(zhǔn)品建議設(shè)置雙復(fù)孔降低誤差）。

公司正在出售的產(chǎn)品：

實(shí)驗(yàn)操作流程：

預(yù)處理：試劑盒全部試劑室溫回溫 30min，稀釋濃縮洗滌液，梯度稀釋 FSA 標(biāo)準(zhǔn)品。

板孔加樣：各微孔加入標(biāo)準(zhǔn)品、待測(cè)體液樣本、空白對(duì)照 100μL。

一步法酶抗添加：每孔加入 HRP 標(biāo)記 FSA 抗體 100μL，封板震蕩 30s。

恒溫結(jié)合孵育：37℃避光孵育 63min。

洗板操作：倒掉廢液，洗液浸泡 35s 拍干，循環(huán)洗板 5 次。

避光顯色：加入顯色 A、B 液各 50μL，顯色 16min。

終止檢測(cè)：終止液終止顯色，酶標(biāo)儀 450nm 測(cè)定 OD 值，定量 FSA 抗原濃度。