本試劑盒采用間接法酶聯(lián)免疫吸附檢測原理，將純化的破傷風抗原包被在酶標板微孔表面，構(gòu)建固相抗原體系。檢測過程中，樣本中的人破傷風抗體可與固相破傷風抗原特異性結(jié)合，孵育洗滌后，加入辣根過氧化物酶標記的抗人IgG抗體，使其與結(jié)合在固相抗原上的待測抗體結(jié)合，再次洗滌后加入底物顯色，經(jīng)終止液終止反應后測定吸光度，吸光度數(shù)值高低與樣本中破傷風抗體的含量成正比，通過標準曲線即可換算出樣本中抗體的有效濃度。
產(chǎn)品參數(shù)：
產(chǎn)品名稱 | 人破傷風抗體(Tetanus Ab)ELISA試劑盒 | 貨號 | Y-E587 |
英文名稱 | Tetanus Antibody Elisa Kit | 規(guī)格 | 48T/96T |
?靈敏度：最低檢出濃度 0.06IU/mL 破傷風特異性抗體
檢測范圍：0.1IU/mL～16IU/mL
反應時間：一抗結(jié)合孵育 40min，酶標記物溫育 45min，避光顯色 15min
保存條件：整套試劑盒 2～8℃冷藏，嚴禁冷凍；濃縮洗滌液低溫析出結(jié)晶可 37℃水浴溶解后正常使用
顯色系統(tǒng)：雙組份 A+B 混合 TMB 顯色體系
檢測波長：單波長 450nm 直接測定
標準曲線繪制：采用線性回歸擬合，標準品梯度濃度對應 OD 值建立回歸方程計算樣本濃度
注意事項：采血樣本不可溶血，溶血紅細胞成分會造成假陽性；底物液接觸皮膚需立刻清水沖洗
儲存與有效期：
未開封整套試劑盒：2～8℃避光冷藏，禁止冷凍；有效期 12 個月。
開封后保存
剩余酶標板條：自封袋密封，內(nèi)置干燥劑 2～8℃避光；1 個月內(nèi)用完。
HRP 酶結(jié)合物、TMB 底物：避光 2～8℃，避免光照失效。
濃縮洗滌液：2～30℃常溫保存，結(jié)晶溫水溶解不影響效果。
復溶后標準品：分裝 - 20℃凍存，避免反復凍融，1 個月內(nèi)使用。
過期試劑禁止使用。
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實驗操作流程：
試劑盒試劑室溫復溫 25min，濃縮洗滌液用去離子水按比例稀釋備用；拆分酶標板條，做好組別標記。
標準品孔添加梯度稀釋破傷風抗體標準品 50μL，待測樣本孔加入預處理待測樣本 50μL，空白孔留空不加樣。
所有非空白孔加入一步法酶聯(lián)二抗混合工作液 100μL，封板封口防止揮發(fā)。
37℃水浴避光孵育 55min，期間勿挪動酶標板位置。
傾倒孔內(nèi)廢液，每孔注滿洗滌液浸泡 35s 后拍干，連續(xù)洗板 4 次，吸水紙徹底拍凈孔底殘液。
依次每孔加入顯色液 A、B 各 50μL，避光環(huán)境 37℃反應 12min，觀察孔內(nèi)藍色顯色梯度。
加入終止液 50μL 終止反應，酶標儀 450nm 測吸光度，擬合標準曲線換算樣本破傷風抗體含量。
關(guān)鍵字： 人破傷風抗體;Tetanus Ab;ELISA試劑盒;
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