本試劑盒運用雙抗體夾心酶聯(lián)免疫吸附技術(shù)原理，酶標(biāo)板預(yù)先包被抗人葡萄糖6磷酸異構(gòu)酶特異性單克隆抗體。檢測時，樣本內(nèi)的葡萄糖6磷酸異構(gòu)酶抗原與固相抗體特異性結(jié)合，孵育完成后洗滌去除未結(jié)合成分，加入HRP標(biāo)記的檢測抗體形成夾心免疫復(fù)合物，再次洗滌后加入TMB底物顯色，底物在酶的催化下生成藍色產(chǎn)物，加入終止液后轉(zhuǎn)為黃色，吸光度值與樣本中GPI含量正相關(guān)，依托標(biāo)準(zhǔn)曲線可精準(zhǔn)定量待測樣本中的指標(biāo)濃度。
產(chǎn)品參數(shù)：

?靈敏度：最小檢測值 0.05U/L

檢測范圍：0.15U/L～19.2U/L

反應(yīng)時間：37℃樣本孵育 60min，酶結(jié)合物孵育 48min，避光顯色 16min

保存條件：未開封 2-8℃；微孔板拆封后需裝入自封袋加干燥劑密封冷藏

顯色系統(tǒng)：可溶性單組分 TMB 顯色試劑

檢測波長：450nm 單波長檢測

標(biāo)準(zhǔn)曲線繪制：四參數(shù)非線性擬合，剔除偏差過大標(biāo)準(zhǔn)孔后構(gòu)建曲線

注意事項：血漿樣本建議使用 EDTA 抗凝，肝素抗凝易抑制酶促反應(yīng)導(dǎo)致結(jié)果偏低
關(guān)鍵注意事項：

實驗前需仔細閱讀對應(yīng)試劑盒的說明書，不同試劑盒的孵育時間、加樣量可能存在差異

所有試劑需按要求儲存，未用完的試劑需密封后放回規(guī)定溫度（通常2-8℃或-20℃）

避免試劑污染，不同組分的移液器槍頭需分開使用

洗板時需確保每孔都被洗滌液覆蓋，防止出現(xiàn)假陽性結(jié)果

顯色過程需避光，避免陽光直射影響結(jié)果

公司正在出售的產(chǎn)品：

實驗操作流程：

試劑盒組分室溫平衡 28min，配制工作洗滌液；取出所需包被板條，做好實驗標(biāo)記。

梯度 GPI 標(biāo)準(zhǔn)品 50μL 加入標(biāo)準(zhǔn)孔，待測稀釋樣本 50μL 加入樣本孔，空白孔不加試劑。

所有加樣孔加入一步法酶結(jié)合抗體工作液 100μL，封板后輕微震蕩混勻孔內(nèi)液體。

37℃避光孵育 60min，嚴(yán)格把控孵育時長。

倒掉孔中液體，洗滌液加滿每孔，浸泡 30s 后甩干，循環(huán)洗板 5 次，徹底去除未結(jié)合雜質(zhì)。

每孔加入顯色 A 液 50μL、顯色 B 液 50μL，避光 37℃顯色 14min。

加入終止液終止反應(yīng)，酶標(biāo)儀 450nm 讀數(shù)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線計算樣本 GPI 含量。