本試劑盒基于雙抗體夾心ELISA檢測原理,酶標板微孔包被抗人羥脯氨酸糖蛋白特異性抗體。樣本中的HRGP抗原與固相抗體特異性結(jié)合,孵育洗滌后加入HRP標記檢測抗體,形成穩(wěn)定的免疫夾心復(fù)合物,經(jīng)底物顯色、終止反應(yīng)后,通過酶標儀讀取吸光度值,結(jié)合標準曲線即可精準測定樣本中羥脯氨酸糖蛋白的含量。
產(chǎn)品參數(shù):
產(chǎn)品名稱 | 人羥脯氨酸糖蛋白(HRGP)ELISA試劑盒 | 貨號 | Y-E817 |
英文名稱 | HRGP Elisa Kit | 規(guī)格 | 48T/96T |
?靈敏度:最低可測 0.105ng/mL
檢測范圍:0.33ng/mL~21.12ng/mL
反應(yīng)時間:室溫結(jié)合 64min,37℃二抗 55min,顯色 18min
保存條件:整套試劑 2~8℃避光防潮,濃縮洗滌液稀釋后室溫可存 5 天
顯色系統(tǒng):單組份穩(wěn)定 TMB 顯色液
檢測波長:450nm+630nm 雙波長
標準曲線繪制:最小二乘法線性回歸構(gòu)建標準曲線
注意事項:植物源性樣本混入會嚴重干擾 HRGP 檢測,操作環(huán)境避免外源蛋白污染
關(guān)鍵注意事項:
本試劑盒僅科研體外檢測,嚴禁臨床診斷使用。
全程避免試劑、板條強光直射,TMB 見光易失效。
移液器吸頭一次性使用,杜絕交叉污染;所有操作無酶、無熱源。
孵育溫度嚴格控制 37℃,溫度偏低會降低 OD 值、靈敏度下降。
洗板必須充分,殘液會造成非特異性結(jié)合,背景偏高。
終止后需快速讀數(shù),放置過久吸光度會漂移,結(jié)果失真。
終止液含稀硫酸,避免接觸皮膚、眼睛,若不慎接觸大量清水沖洗。
實驗廢棄物按生物安全廢棄物規(guī)范處理。
不同批次試劑盒組分不可混用。
試劑盒運輸全程 2~8℃冷鏈,嚴禁高溫暴曬。
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實驗操作流程:
全部組分室溫平衡 35min,稀釋濃縮洗滌緩沖液;組裝酶標板并標記標準、樣本、空白孔。
標準品孔加入倍比稀釋 HRGP 標準品 50μL,樣本孔加入稀釋待測樣品 50μL,空白孔不加試劑。
每孔加入一步法酶標記抗體工作液 100μL,密封封板膜。
37℃恒溫避光孵育 66min,保證免疫反應(yīng)完全。
洗板 4 次,每次洗滌液浸泡 36s,甩干后吸干孔底殘留液體。
每孔添加顯色底物 A、B 各 50μL,避光 37℃顯色 16min。
終止液終止反應(yīng),酶標儀 450nm 讀取 OD 值,對照曲線計算 HRGP 含量。
關(guān)鍵字: 人羥脯氨酸糖蛋白;HRGP;ELISA試劑盒;
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