本試劑盒基于雙抗體夾心酶聯(lián)免疫吸附試驗原理,酶標板微孔預(yù)先包被抗人殺菌肽B特異性抗體。待測樣本中的CecB抗原與固相抗體特異性結(jié)合,洗滌去除游離雜質(zhì)后,加入酶標記二抗孵育結(jié)合,形成固相免疫復(fù)合物,經(jīng)顯色、終止反應(yīng)后測定吸光度,依據(jù)標準曲線定量檢測樣本中殺菌肽B的濃度。
產(chǎn)品參數(shù):
產(chǎn)品名稱 | 人殺菌肽B(CecB)ELISA試劑盒 | 貨號 | Y-E2974 |
英文名稱 | CecB ELISA Kit | 規(guī)格 | 48T/96T |
?靈敏度:檢出下限 1.5pg/mL
檢測范圍:4.2pg/mL~268.8pg/mL
反應(yīng)時間:室溫孵育 74min,37℃二抗 61min,避光顯色 22min
保存條件:多肽類標準品分裝 - 20℃凍存,試劑盒主體 2~8℃避光
顯色系統(tǒng):一體式預(yù)制 TMB 顯色工作液
檢測波長:450nm 主波長,650nm 參比
標準曲線繪制:競爭法反向四參數(shù) Logistic 擬合曲線
注意事項:抗菌肽易被蛋白酶降解,樣本采集后立即添加蛋白酶抑制劑
試劑盒組成:
預(yù)包被抗體/抗原微孔板 96孔/48孔 固定捕獲抗體/抗原,結(jié)合目標物
標準品 6支/套 制備標準曲線,定量檢測依據(jù)
生物素標記抗體/抗原 1瓶 識別并結(jié)合目標物,提供酶結(jié)合位點
辣根過氧化物酶(HRP)標記親和素 1瓶 與生物素結(jié)合,催化底物顯色
底物溶液A、B 各1瓶 混合后作為酶促反應(yīng)底物,產(chǎn)生顏色變化
終止液 1瓶 終止酶促反應(yīng),穩(wěn)定顯色結(jié)果
濃縮洗滌液 1瓶 清洗微孔板,去除未結(jié)合物質(zhì)
封板膜 2張 孵育過程中防止污染和揮發(fā)
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實驗操作流程:
全部試劑室溫平衡 30min,稀釋濃縮洗滌液;固定酶標板框架標注孔位信息。
梯度 CecB 標準品 50μL 加入標準孔,稀釋待測樣本 50μL 加入樣本孔,空白孔不加試劑。
各檢測孔加入一步法酶聯(lián)抗體工作液 100μL,封板后輕微震蕩混勻。
37℃恒溫避光孵育 60min,小分子肽類穩(wěn)定孵育時長。
傾倒孔內(nèi)廢液,洗滌液洗板 4 次,每次浸泡 36s,吸水紙吸干殘液。
每孔添加顯色混合底物 100μL,37℃避光顯色 14min。
加入終止液 50μL,酶標儀 450nm 讀數(shù),對照標準曲線定量殺菌肽 B 濃度。
關(guān)鍵字: 人殺菌肽B;CecB;ELISA試劑盒;
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