本試劑盒采用競(jìng)爭(zhēng)法酶聯(lián)免疫吸附檢測(cè)原理，酶標(biāo)板微孔包被純化的人神經(jīng)激肽B抗原。檢測(cè)體系中，樣本中的NKB與固相抗原競(jìng)爭(zhēng)結(jié)合酶標(biāo)記特異性抗體，樣本中NKB含量越高，結(jié)合的酶標(biāo)抗體越少，顯色越淺，終止反應(yīng)后測(cè)定吸光度，通過(guò)標(biāo)準(zhǔn)競(jìng)爭(zhēng)曲線(xiàn)精準(zhǔn)換算樣本中神經(jīng)激肽B的含量。
產(chǎn)品參數(shù)：
產(chǎn)品名稱(chēng) | 人神經(jīng)激肽B(NKB)ELISA試劑盒 | 貨號(hào) | Y-E205 |
英文名稱(chēng) | NKB Elisa Kit | 規(guī)格 | 48T/96T |
?靈敏度：最小可測(cè) 1.7pg/mL
檢測(cè)范圍：4.8pg/mL～307.2pg/mL
反應(yīng)時(shí)間：競(jìng)爭(zhēng)性孵育 88min，二抗結(jié)合 68min，顯色 24min
保存條件：標(biāo)準(zhǔn)品 - 20℃分裝凍存，試劑盒主體 2～8℃冷藏防潮
顯色系統(tǒng)：?jiǎn)谓M份 TMB 穩(wěn)定顯色液
檢測(cè)波長(zhǎng)：450nm+650nm 雙波長(zhǎng)校正
標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)繪制：競(jìng)爭(zhēng)法反向四參數(shù)擬合標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)
注意事項(xiàng)：樣本必須添加廣譜蛋白酶抑制劑，內(nèi)源肽酶會(huì)快速降解神經(jīng)激肽 B
關(guān)鍵注意事項(xiàng)：
本試劑盒僅科研體外檢測(cè)，嚴(yán)禁臨床診斷使用。
全程避免試劑、板條強(qiáng)光直射，TMB 見(jiàn)光易失效。
移液器吸頭一次性使用，杜絕交叉污染；所有操作無(wú)酶、無(wú)熱源。
孵育溫度嚴(yán)格控制 37℃，溫度偏低會(huì)降低 OD 值、靈敏度下降。
洗板必須充分，殘液會(huì)造成非特異性結(jié)合，背景偏高。
終止后需快速讀數(shù)，放置過(guò)久吸光度會(huì)漂移，結(jié)果失真。
終止液含稀硫酸，避免接觸皮膚、眼睛，若不慎接觸大量清水沖洗。
實(shí)驗(yàn)廢棄物按生物安全廢棄物規(guī)范處理。
不同批次試劑盒組分不可混用。
試劑盒運(yùn)輸全程 2～8℃冷鏈，嚴(yán)禁高溫暴曬。
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實(shí)驗(yàn)操作流程：
全部試劑室溫放置 29min，稀釋濃縮洗滌緩沖液；取出包被板條標(biāo)記孔位信息。
梯度 NKB 標(biāo)準(zhǔn)品 50μL 加入標(biāo)準(zhǔn)孔，待測(cè)稀釋樣本 50μL 加入樣本孔，空白孔空置。
加樣孔加入一步法酶聯(lián)特異性抗體工作液 100μL，封板嚴(yán)實(shí)密封。
37℃恒溫避光孵育 58min，小分子神經(jīng)肽縮短基礎(chǔ)孵育時(shí)間。
傾倒廢液，洗滌液洗板 5 次，每次浸泡 33s，反復(fù)拍干板條水分。
依次添加顯色底物 A、B 各 50μL，避光 37℃顯色 14min。
終止液終止顯色反應(yīng)，450nm 測(cè) OD 值，依據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)計(jì)算神經(jīng)激肽 B 濃度。
關(guān)鍵字： 人神經(jīng)激肽B;NKB;ELISA試劑盒;
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