本試劑盒采用雙抗體夾心酶聯(lián)免疫吸附試驗原理，微孔板固定人嗜酸性白血球相關RNA水解酵素家族成員1(EAR1)特異性抗體，樣本與標準品中的EAR1抗原與固相抗體特異性結合，洗滌去除雜質(zhì)后加入酶標記配對抗體，形成夾心免疫復合物，經(jīng)顯色、終止反應后檢測吸光度，吸光度值與樣本中EAR1含量呈正相關，通過標準曲線完成定量檢測。
基本參數(shù)?：
產(chǎn)品名稱：人嗜酸性白血球相關之RNA水解酵素家族成員1(EAR1)ELISA試劑盒
英文名稱：EAR1 ELISA Kit
貨號：Y-E2596
規(guī)格：48T/96T
靈敏度：最小檢出 5.2pg/mL
檢測范圍：30pg/mL ~ 1100pg/mL
反應時間：室溫孵育 84min，二抗溫育 50min，避光顯色 22min，總時長 2h36min
保存條件：整套試劑 2~8℃冷藏，干粉標準品 - 20℃儲存，復溶后僅限當日使用
顯色系統(tǒng)：單組分即用 TMB 顯色，強酸終止液終止
檢測波長：僅 450nm 測定吸光度
標準曲線繪制：線性最小二乘法回歸，7 個稀釋梯度點
注意事項：過敏性疾病樣本指標易超標，超量程必須稀釋復測；避免孔間液體交叉污染
試劑盒組成：
預包被抗體/抗原微孔板 96孔/48孔 固定捕獲抗體/抗原，結合目標物
標準品 6支/套 制備標準曲線，定量檢測依據(jù)
生物素標記抗體/抗原 1瓶 識別并結合目標物，提供酶結合位點
辣根過氧化物酶（HRP）標記親和素 1瓶 與生物素結合，催化底物顯色
底物溶液A、B 各1瓶 混合后作為酶促反應底物，產(chǎn)生顏色變化
終止液 1瓶 終止酶促反應，穩(wěn)定顯色結果
濃縮洗滌液 1瓶 清洗微孔板，去除未結合物質(zhì)
封板膜 2張 孵育過程中防止污染和揮發(fā)
實驗步驟如下：
試劑盒室溫回溫 27min，配制洗滌工作液，倍比稀釋 EAR1 標準品，標記酶標板孔位。
標準孔添加 50μL 梯度標準品；樣本孔加 50μL 稀釋液 + 10μL 待測樣本；空白孔空置不加液。
非空白孔加入酶結合特異性抗體 100μL，封板密封，37℃孵育 60min。
撕去封板膜，洗滌液加滿每孔靜置 34s，甩干洗板 5 次，吸水紙拍凈殘留液體。
顯色 A、B 液各 50μL 加入每孔，震蕩混勻，避光顯色 15min。
滴加 50μL 終止液混勻終止反應。
450nm 波長檢測吸光度，計算樣本 EAR1 含量。
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