本試劑盒采用雙抗體夾心酶聯(lián)免疫吸附試驗原理，微孔板固相固定人胎盤催乳素(HPL)特異性抗體，樣本與標準品中的HPL抗原與固相抗體特異性結合，孵育洗滌后加入酶標記配對抗體，構建穩(wěn)定免疫復合物，經底物顯色、終止反應后檢測吸光度，數(shù)值與樣本中HPL濃度呈正相關，依托標準曲線完成定量檢測。
基本參數(shù)?：

產品名稱：人胎盤催乳素(HPL)ELISA試劑盒

英文名稱：HPL ELISA Kit
貨號：Y-E2718

規(guī)格：48T/96T

靈敏度：最小檢出 0.04μg/mL

檢測范圍：0.2μg/mL ~ 32μg/mL

反應時間：室溫孵育 82min，酶二抗 57min，避光顯色 20min，總用時 2h39min

保存條件：試劑盒 2~8℃避光存放，拆分板條密封防潮，洗滌液可常溫放置

顯色系統(tǒng)：雙組份配比顯色體系，2mol/L H?SO?終止反應

檢測波長：僅 450nm 波長讀取吸光度

標準曲線繪制：四參數(shù) Logistic 擬合標準曲線，7 個濃度梯度

注意事項：非孕期樣本含量極低，超出下限按陰性判定；胎盤組織勻漿樣本充分離心去雜質
通用注意事項：

樣本要求

血清、血漿避免嚴重溶血、脂血、黃疸；組織勻漿充分離心去除沉淀；樣本分裝凍存，反復凍融≥3 次會導致抗原降解，檢測值偏低。

溫度控制

孵育溫度嚴格 37℃，溫箱溫度波動、室溫過低會降低結合效率，背景升高、重復性變差。

避光操作

TMB 底物、酶結合物、神經遞質 / 維生素類靶標樣本見光易氧化，顯色全程避光，試劑避光存放。

洗板規(guī)范

洗滌不充分會造成高背景、假陽性；拍干時使用干凈吸水紙，禁止交叉污染微孔。

污染防控

實驗耗材無 DNase、RNase、蛋白酶；槍頭一次性更換，標準品與樣本避免交叉加樣；底物液變色、出現(xiàn)沉淀不可使用。

安全防護

終止液含稀硫酸，具有腐蝕性，避免接觸皮膚、黏膜；實驗廢液集中收集中和后處理，不可直接傾倒。

失效判定

試劑盒超出有效期、試劑渾濁變色、標準品梯度無明顯顏色差異，均判定失效，禁止繼續(xù)實驗。

稀釋校正

樣本 OD 值高于最高標準孔時，必須稀釋重測，最終結果乘以稀釋倍數(shù)；低于最低檢測限標注 “低于試劑盒靈敏度”。

空白對照

空白孔吸光度應極低，若空白孔 OD＞0.1，說明洗滌不充分或試劑污染，實驗作廢重做。

儲存禁忌

試劑盒不可冷凍結冰，冷凍會造成酶標抗體蛋白變性，直接導致試劑盒完全失效。
實驗步驟如下：

試劑室溫靜置 32min，配制洗滌工作液，倍比稀釋 HPL 標準品，取出實驗所需酶標板條。

標準孔添加 50μL 梯度標準品；樣本孔加 45μL 稀釋液 + 15μL 待測血清；空白孔空置不加液。

非空白孔加入酶偶聯(lián)抗 HPL 抗體 100μL，封板密封，37℃孵育 63min。

撕膜棄液，洗滌液加滿每孔靜置 36s，甩干洗板 5 次，充分拍干微孔板。

顯色 A、B 液各 50μL 加入每孔，震蕩混勻，避光顯色 16min。

滴加 50μL 終止液混勻終止顯色。

酶標儀 450nm 測 OD 值，換算樣本胎盤催乳素 HPL 濃度。
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