本試劑盒運(yùn)用雙抗體夾心ELISA檢測(cè)原理,微孔板固相包被PLC特異性抗體,樣本中的人磷酯酶C與固相抗體特異性結(jié)合,再加入HRP標(biāo)記的檢測(cè)抗體形成夾心免疫復(fù)合物,經(jīng)洗板、顯色、終止反應(yīng)后,依據(jù)吸光度數(shù)值和標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn),定量檢測(cè)樣本中PLC的濃度。
產(chǎn)品參數(shù):
產(chǎn)品名稱(chēng) | 人磷酯酶C(PLC)ELISA試劑盒 | 貨號(hào) | Y-E945 |
英文名稱(chēng) | PLC Elisa Kit | 規(guī)格 | 48T/96T |
?靈敏度:≤0.1ng/mL
檢測(cè)范圍:0.4ng/mL–22ng/mL
反應(yīng)時(shí)間:37℃孵育總時(shí)長(zhǎng) 130min
保存條件:2~8℃冷藏,濃縮試劑稀釋后不可長(zhǎng)期留存
顯色系統(tǒng):TMB 雙液混合顯色
檢測(cè)波長(zhǎng):450nm
標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)繪制:扣除空白孔后線(xiàn)性擬合標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)
注意事項(xiàng):樣本避免蛋白酶污染,防止目標(biāo)蛋白被降解
關(guān)鍵注意事項(xiàng):
實(shí)驗(yàn)前需仔細(xì)閱讀對(duì)應(yīng)試劑盒的說(shuō)明書(shū),不同試劑盒的孵育時(shí)間、加樣量可能存在差異
所有試劑需按要求儲(chǔ)存,未用完的試劑需密封后放回規(guī)定溫度(通常2-8℃或-20℃)
避免試劑污染,不同組分的移液器槍頭需分開(kāi)使用
洗板時(shí)需確保每孔都被洗滌液覆蓋,防止出現(xiàn)假陽(yáng)性結(jié)果
顯色過(guò)程需避光,避免陽(yáng)光直射影響結(jié)果
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實(shí)驗(yàn)操作流程:
樣本制備:體液樣本離心去除雜質(zhì),按比例稀釋混勻;
加樣布設(shè):微孔板各孔添加標(biāo)準(zhǔn)品、待測(cè)樣本 100μL;
一步孵育結(jié)合:直接加入酶結(jié)合液,封板 37℃孵育 62min;
洗板流程:棄液后洗滌液浸泡 30s,拍干,洗板 5 次;
避光顯色:加入顯色液孵育 16min;
終止顯色:加入終止液終止酶促反應(yīng);
濃度測(cè)定:酶標(biāo)儀讀數(shù)計(jì)算 PLC 磷酯酶 C 含量。
關(guān)鍵字: 人磷酯酶C;PLC;ELISA試劑盒;
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