本試劑盒基于雙抗體夾心酶聯(lián)免疫吸附原理，微孔板預包被PLCγ1特異性捕獲抗體，樣本中的人磷酯酶Cγ鏈被特異性捕獲，與酶標檢測抗體結合形成穩(wěn)定復合物，洗滌純化后進行底物顯色，顯色深淺與PLCγ1含量成正比，通過標準曲線實現(xiàn)精準定量檢測。
產(chǎn)品參數(shù)：

?靈敏度：≤0.045ng/mL

檢測范圍：0.16ng/mL–9ng/mL

反應時間：濕盒孵育合計 142min

保存條件：微孔板密封防潮 2–8℃，其余組分常規(guī)冷藏

顯色系統(tǒng)：單組份穩(wěn)定 TMB 顯色液

檢測波長：450nm，參比 620nm

標準曲線繪制：四參數(shù)回歸法構建標準曲線

注意事項：組織裂解液需添加蛋白酶抑制劑后再上機檢測
通用注意事項：

樣本要求

血清、血漿避免嚴重溶血、脂血、黃疸；組織勻漿充分離心去除沉淀；樣本分裝凍存，反復凍融≥3 次會導致抗原降解，檢測值偏低。

溫度控制

孵育溫度嚴格 37℃，溫箱溫度波動、室溫過低會降低結合效率，背景升高、重復性變差。

避光操作

TMB 底物、酶結合物、神經(jīng)遞質(zhì) / 維生素類靶標樣本見光易氧化，顯色全程避光，試劑避光存放。

洗板規(guī)范

洗滌不充分會造成高背景、假陽性；拍干時使用干凈吸水紙，禁止交叉污染微孔。

污染防控

實驗耗材無 DNase、RNase、蛋白酶；槍頭一次性更換，標準品與樣本避免交叉加樣；底物液變色、出現(xiàn)沉淀不可使用。

安全防護

終止液含稀硫酸，具有腐蝕性，避免接觸皮膚、黏膜；實驗廢液集中收集中和后處理，不可直接傾倒。

失效判定

試劑盒超出有效期、試劑渾濁變色、標準品梯度無明顯顏色差異，均判定失效，禁止繼續(xù)實驗。

稀釋校正

樣本 OD 值高于最高標準孔時，必須稀釋重測，最終結果乘以稀釋倍數(shù)；低于最低檢測限標注 “低于試劑盒靈敏度”。

空白對照

空白孔吸光度應極低，若空白孔 OD＞0.1，說明洗滌不充分或試劑污染，實驗作廢重做。

儲存禁忌

試劑盒不可冷凍結冰，冷凍會造成酶標抗體蛋白變性，直接導致試劑盒完全失效。

公司正在出售的產(chǎn)品：

實驗操作流程：

樣本處理：細胞裂解上清離心取上清，稀釋后充分吹打；

板孔加樣：每孔加入梯度標準品、待測上清樣本 100μL；

同步孵育：直接加入酶標抗體工作液，覆膜 37℃孵育 68min；

洗板操作：洗滌液浸泡 32s，拍干，循環(huán)洗板 4 次；

底物顯色：避光加入 TMB 顯色液 17min；

終止反應：滴加終止液混勻；

儀器檢測：酶標儀測吸光度，計算 PLCγ1 蛋白表達量。