本試劑盒運(yùn)用經(jīng)典雙夾心酶聯(lián)免疫吸附原理，固相酶標(biāo)板包被抗人ProGRP特異性單克隆抗體，特異性捕獲樣本中的胃泌素釋放肽前體，孵育結(jié)合后洗除雜質(zhì)，加入酶標(biāo)記配對(duì)二抗形成免疫復(fù)合物，經(jīng)洗滌純化體系后加入底物顯色，終止反應(yīng)后檢測(cè)吸光度，結(jié)合標(biāo)準(zhǔn)曲線可精準(zhǔn)定量樣本中ProGRP的表達(dá)水平。
基本參數(shù)?：

產(chǎn)品名稱：人胃泌素釋放肽前體(ProGRP)ELISA試劑盒

英文名稱：ProGRP  Elisa Kit
貨號(hào)：Y-E365

規(guī)格：48T/96T

靈敏度：最低檢出 0.04pg/mL

檢測(cè)范圍：0.08～7.6pg/mL

反應(yīng)時(shí)間：37℃孵育 100min，酶結(jié)合物 63min，避光顯色 14min

保存條件：整套試劑 2～8℃避光存放，不可倒置試劑瓶

顯色系統(tǒng)：A 液基質(zhì) + B 液催化劑混合顯色

檢測(cè)波長(zhǎng)：450nm+630nm 雙波長(zhǎng)扣除背景

標(biāo)準(zhǔn)曲線繪制：6 個(gè)標(biāo)品梯度，軟件自動(dòng)擬合標(biāo)準(zhǔn)曲線方程

注意事項(xiàng)：反復(fù)凍融樣本會(huì)造成 ProGRP 裂解，結(jié)果顯著偏低
實(shí)驗(yàn)前準(zhǔn)備工作：

1. 試劑平衡與稀釋

試劑盒所有組分（酶標(biāo)板、標(biāo)準(zhǔn)品、酶結(jié)合物、底物、洗滌濃縮液、樣本稀釋液、終止液）從 2~8℃取出，室溫（20~25℃）放置平衡 30min，嚴(yán)禁直接低溫操作。

濃縮洗滌液配制：按標(biāo)簽標(biāo)注比例用去離子純水稀釋（常見(jiàn) 20× 濃縮液：1 份濃縮液 + 19 份純水），混勻備用，現(xiàn)配現(xiàn)用。

標(biāo)準(zhǔn)品復(fù)溶 / 梯度稀釋：

凍干標(biāo)準(zhǔn)品加入配套標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液充分溶解，室溫靜置 10min，輕柔吹打混勻；

按說(shuō)明書(shū)梯度倍比稀釋出 5~7 個(gè)濃度梯度標(biāo)準(zhǔn)品，單獨(dú)標(biāo)記，剩余原液分裝 - 20℃避光保存，避免反復(fù)凍融。

待測(cè)樣本預(yù)處理：血清 / 血漿、組織勻漿、細(xì)胞上清用樣本稀釋液適當(dāng)稀釋，渾濁樣本 12000r/min 離心 10min 取上清；溶血、脂血嚴(yán)重樣本棄用。

2. 耗材與設(shè)備準(zhǔn)備

設(shè)備：恒溫 37℃孵育箱、酶標(biāo)儀（450nm 主波長(zhǎng)，630nm 參比）、多通道移液槍、吸水濾紙、洗板機(jī)（或手動(dòng)洗板槽）、封板膜、離心管。

耗材無(wú)核酸酶、無(wú)熱源、無(wú)蛋白污染，移液槍提前校準(zhǔn)。

取出本次實(shí)驗(yàn)所需酶標(biāo)板條，剩余未使用板條裝入鋁箔密封袋，加干燥劑 2~8℃避光保存。

3. 孔位規(guī)劃標(biāo)記

酶標(biāo)板做好分區(qū)標(biāo)記：空白孔、零標(biāo)準(zhǔn)孔、梯度標(biāo)準(zhǔn)品孔、待測(cè)樣本孔、復(fù)孔（所有樣本、標(biāo)準(zhǔn)品建議設(shè)置雙復(fù)孔降低誤差）。
實(shí)驗(yàn)步驟如下：

試劑盒室溫平衡 26min，ProGRP 包被酶標(biāo)板棄保護(hù)液，洗滌緩沖液洗板 2 次，倒扣拍干微孔。

劃分孔位：空白孔、倍比標(biāo)準(zhǔn)品孔、血清待測(cè)樣本孔；標(biāo)準(zhǔn)品孔加入 ProGRP 標(biāo)準(zhǔn)品 50μL，樣本孔加入稀釋血清 50μL，空白孔補(bǔ)稀釋緩沖液。

每孔加入酶標(biāo)記檢測(cè)抗體 50μL，覆膜封板，37℃孵育 66min。

棄去孔內(nèi)液體，洗板液加滿每孔靜置 30s 倒掉，重復(fù)洗板 5 次，吸水紙徹底拍干。

依次添加顯色 A 液、B 液各 50μL，遮光室溫顯色 13min。

加入終止液 50μL 混勻終止顯色反應(yīng)。

酶標(biāo)儀 450nm 測(cè) OD 值，對(duì)照曲線計(jì)算 ProGRP 濃度。
公司正在出售的產(chǎn)品：